【摘 要】
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目的:研究中空聚多巴胺（Ploydapamine,PDA）纳米超声造影剂对动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）斑块稳定性的影响及其机制。方法:本实验分别探究了中空PDA纳米超声造影剂的基本性质和对斑块稳定性的影响及机制。中空PDA基本性质实验:利用DLS、XRD和TEM探究中空PDA的大小,元素分布及外貌等理化性质;体外自制琼脂糖模型超声造影、新西兰兔心脏超声造影检测体内外显影效果
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目的:研究中空聚多巴胺（Ploydapamine,PDA）纳米超声造影剂对动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）斑块稳定性的影响及其机制。方法:本实验分别探究了中空PDA纳米超声造影剂的基本性质和对斑块稳定性的影响及机制。中空PDA基本性质实验:利用DLS、XRD和TEM探究中空PDA的大小,元素分布及外貌等理化性质;体外自制琼脂糖模型超声造影、新西兰兔心脏超声造影检测体内外显影效果;CCK-8法检测中空PDA的细胞毒性;血常规、肝肾功能和重要器官组织切片探究中空PDA的体内生物安全性。探究对斑块稳定性的影响及机制实验:通过100 ng/ml佛波酯（Phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA）孵育THP-1细胞48 h将其诱导为巨噬细胞后再用氧化低密度脂蛋白（Oxidized low density lipoproteins,ox-LDL）孵育48 h诱导为泡沫细胞,并随机分为泡沫细胞组和泡沫细胞+中空PDA组;油红“O”染色评估模型建立;Western Blot实验评估CREB、MMP-9蛋白表达水平;实时剪切波弹性成像和超声造影评估斑块杨氏模量和造影峰值强度;ELISA实验检测新西兰兔血清中IL-17A和hs-CRP含量。结果:中空PDA基本性质实验结果发现:1 DLS、XRD和TEM结果提示,中空PDA为平均粒径200 nm左右、带负电荷的中空结构的纳米颗粒,紫外光谱特征吸收峰位于203 nm处,主要组成元素为锌,是良好的锌释放容器;2体外自制琼脂糖模型和新西兰兔心脏超声造影实验结果显示中空PDA具有一定的体内外显影效果;3 CCK-8显示中空PDA对细胞活力没有明显影响;4血常规和肝肾功能检测结果提示中空PDA处理组和对照组间差异没有统计学意义（P＞0.05）5重要器官组织切片显示中空PDA处理组新西兰兔未见病变和纤维化。探究斑块稳定性的影响及机制实验:1油红“O”染色证明泡沫细胞建模成功（P＜0.01）,且泡沫细胞CREB蛋白表达显著性高于巨噬细胞（P＜0.05）;2 Western Blot实验结果显示泡沫细胞+中空PDA组CREB和MMP-9蛋白表达水平较泡沫细胞组显著下降（P＜0.05）;3实时剪切波弹性成像及超声造影结果提示中空PDA处理组斑块杨氏模量值显著性升高（P＜0.01）,造影峰值强度值明显下降（P＜0.01）;4 Western Blot、ELISA实验结果显示中空PDA处理组新西兰兔CREB蛋白的表达（P＜0.01）和炎症因子IL-17A、hs-CRP分泌水平较PBS组显著性降低（P＜0.001）。结论:通过建立琼脂糖体外显影模型、体外泡沫细胞模型和体内AS模型发现,中空PDA具有体内外显影性能和良好的体内外生物安全性。并且,中空PDA具有提高斑块稳定性的功能,而CREB蛋白表达的降低导致的斑块易损标志物和炎症因子的降低在其中起着重要的作用。
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