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心肌缺血/复灌损伤(ischemia/reperfusion)是临床上常见的一种心肌损害现象,目前仍然缺少有效的干预措施,临床危害较大。研究表明缺血预处理或远距预处理具有减轻心肌缺血/复灌损伤、保护心肌的作用,但由于心肌缺血的不可预见性及预处理的创伤性,使得这些预处理保护心肌措施在临床上难以实际运用。远距后处理将远距预处理的无创伤性和缺血后处理的事后保护的优点结合起来,解决了两者在操作时机选择的问题,而且没有缺血后处理需要有创性操作的缺点,因而具有更高的临床应用前景。因此,深入研究缺血/复灌损伤及远距后处理保护的机制、根据该机制或靶点寻找新的干预措施具有重要意义。心肌缺血/复灌后,主要因为激发细胞氧化应激和钙稳态失衡,导致细胞凋亡,加重组织损伤。在细胞凋亡发生过程中,线粒体的正常结构和功能具有关键作用。已有研究发现缺血预处理或远距预处理等保护措施具有减轻缺血再灌注组织氧自由产生,减轻细胞凋亡作用;线粒体渗透性转换孔关闭时具有减轻组织缺血再灌注损伤作用。因此,我们认为远距后处理保护措施可能通过线粒体靶点来抑制细胞凋亡,保护组织缺血/复灌损伤的。本研究分别用动物实验和分离心肌线粒体等方法,探讨远距后处理对心肌损伤的保护作用及线粒体渗透性转换孔的参与机制,为临床缺血/复灌损伤治疗提供一点线索。研究中将雄性SD大鼠随机分成5组,每组12只:假手术组(Sham)、缺血/复灌组(ischemia/reperfusion, I/R)、远距后处理组(remote ischemic postconditioning, RpostC)、远距后处理组+Atr组(RPostC+Atr)、缺血/复灌组+Atr组(I/R+Atr)。所有组大鼠开胸后在冠状动脉左前降支(left anterior descending coronary artery, LAD)下穿线。除Sham组之外,所有大鼠LAD缺血45min复灌180min。RpostC组:在缺血15min后结扎大鼠双侧股动脉5min+复灌5min,并给予3次循环;RPostC+Atr组:同RPostC组,但在复灌前30s给予线粒体渗透性转换孔开放剂苍术苷(Atractyloside, Atr)(5mg/kg);I/R+Atr组:同I/R组,但在复灌前30s给予线粒体渗透性转换孔开放剂Atr(5mg/kg)。实验过程中监测平均动脉压(mean arterial blood pressure, MAP)、心率(heart rate, HR)并计算心率-血压乘积(rate pressure product, RPP)以及心电图Ⅱ导联指标。复灌结束后分别测定血浆乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)活性,测心肌梗死面积;采用酶标仪测定心肌组织线粒体开放性转换孔的变化以及应用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)检测心肌组织中Bax和Bcl-2 mRNA基因表达的变化。结果发现:心肌缺血复灌后,大鼠MAP、HR和RPP降低;心电图ST段抬高;心律失常发生明显,评分增加;LDH及CK活性增加;心肌梗死面积(percentage infarct size/ area at risk, IS/AAR)增大,但远距后处理(RPostC)可以明显改善上述指标,差异有统计学意义(p﹤0.05)。线粒体渗透性转换孔开放剂Atr取消RpostC对心肌损伤指标的改善作用。分离大鼠心肌线粒体,高钙诱导下I/R组线粒体520nm处吸光度的下降明显,提示线粒体渗透性转换孔开放增加,细胞容易发生凋亡,而RPostC处理可以降低线粒体渗透性转换孔的开放,Atr明显增大RPostC组在520nm处吸光度下降程度。RT-PCR检测各组心肌组织内Bax和Bcl-2 mRNA含量,RPostC及Atr对此有相似的影响趋势组。由此可见远距后处理对心肌缺血/复灌损伤有明显的保护作用,其机制可能与抑制线粒体渗透性转换孔开放有关。