赭曲霉毒素A（Ochratoxin A,OTA）是一种有毒的真菌次级代谢物,广泛存在于农作物和加工食品中,具有较强的毒性和致癌性,对人类构成严重的健康威胁。本文以OTA为研究对象,构建了基于寡核苷酸链信号放大的OTA荧光免疫检测方法和基于上转换纳米颗粒信号放大和荧光共振能量转移的OTA免疫检测方法。首先,以柠檬酸三钠还原法制备了粒径均一的金纳米粒子（Au NPs）。将Au NPs与OTA抗体通过静电吸附作用偶联,再与FAM荧光素修饰的寡核苷酸链（ss DNA-FAM）通过Au-S键偶联,制备出荧光探针,利用Au NPs近距离淬灭荧光信号作用和二硫苏糖醇解离寡核苷酸链作用,建立了基于寡核苷酸链信号放大的OTA荧光免疫检测方法。经过优化实验条件,最终确定抗原包被量0.5μg每孔,荧光探针稀释4倍,样品稀释液为含有10%甲醇的PBS。方法的检测限为0.0044μg/L,特异性良好。使用该方法测定玉米、大米、燕麦三种谷物中的OTA含量,结果与超高效液相串联质谱仪（UPLC-MS/MS）验证的结果接近（R~2=0.987）,证明该方法可用于实际样品中OTA的定量检测。其次,以热分解法和配体交换法制备了亲水性上转换纳米颗粒（PAA-Na YF4:Yb,Er UCNPs）。将PAA-UCNPs与OTA抗体通过活化酯法偶联制备荧光信号探针,利用上转换纳米颗粒的荧光信号放大作用以及上转换纳米颗粒与氧化石墨烯构成的荧光共振能量转移体系,建立了基于上转换纳米颗粒信号放大和荧光共振能量转移的OTA免疫检测方法。经过优化实验条件,最终确定信号探针的添加量为25μg,氧化石墨烯添加量为50μL,目标物与信号探针孵育时间60 min。方法的检测限为0.0028μg/L,特异性良好。使用该方法测定玉米、大米、燕麦三种谷物中的OTA含量,结果与超高效液相串联质谱仪（UPLC-MS/MS）验证的结果接近（R~2=0.976）,证明该方法可用于实际样品中OTA的定量检测。