论文部分内容阅读
目的 探讨凋亡抑制蛋白Survivin、细胞周期蛋白CyclinD1及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白P21WAF1/CIP1在宫颈癌中的表达及与Ⅰa～Ⅱb宫颈癌复发的关系。 方法 应用免疫组化链菌素亲生物素-过氧化酶标记法（SP法），检测Survivin、CyclinD1及p21WAF1/CIP1蛋白在55例宫颈癌（鳞癌45例，腺癌10例）及10例正常宫颈组织中的表达。 结果 1．Survivin、CyelinD1及P21WAF1/CIP1蛋白在正常宫颈组织表达的表达率分别为0；10.0％；20.0％，在宫颈鳞癌中表达率分别为68.9％；51.1％；57.8％，在宫颈腺癌中表达率分别为60.0％；90.0％；80.0％；与正常宫颈组织比较，三者在宫颈癌的表达明显增高（P＜0.05）。 2．Survivin或CyclinD1蛋白的表达与鳞癌临床分期及不良病理分级有关（P＜0.05），而P21WAF1/CIP1蛋白的表达与其无关（P＞0.05）。 3．P21WAF1/CIP1与任意蛋白的共表达仅与病理分级有关（P＜0.05）。而Survivin/cyclinD1蛋白的共表达者同时与临床分期及病理分级有关（P＜0.05）。 4．Survivin、cyclinD1蛋白单独表达与Ⅰa-Ⅱb宫颈癌的复发有关（P＜0．05）,二者的共表达与Ⅰa-Ⅱb宫颈癌的淋巴结转移及复发均有关（P＜0．05）. 讨 论 Survivin是活性很强的凋亡抑制蛋白，主要通过间接或直接抑制半眺氨酸蛋白酶caspase－3和 caspase－7的活性而发挥抗凋亡作用。体外研究表明Survivin抗凋亡途径是通过与CDK4结合形成h。ivin—CDK4复合物，从而使 P21W”‘儿‘’‘fA CDK4复合物中释放出来，使plW’‘’“”与Caspase—3酶原结合形成Procaspase一3／P21w＊‘’“’‘复合物，从而阻止细胞凋亡。Survivin的组织分布具有明显的细胞选择性，它主要表达于胚胎和发育的胎儿组织中，但不见于终末分化的成人组织，在人类各种肿瘤中广泛表达，研究表明肿瘤细胞能启动Survivin的基因，使其避开凋亡而异常增生。本实验结果Su。ivin在正常宫颈组织中不表达，鳞癌及腺癌组织中高表达。结果显示Survivin的表达可能促进宫颈癌细胞逃离生长监控，有利于宫颈癌的发生及发展。而且临床资料的分析中发现临床分期愈晚、组织分化程度越低Survivin蛋白表达率愈高。且与＊刁 宫颈癌的复发有相关性，5例复发病例全部Survivin阳性表达。这说明Survivin蛋白的表达预示肿瘤有较高的侵袭性和不良预后。cyclinDI属于 GI期细胞周期蛋白，能够启动细胞周期并促进蛋白合成，在细胞周期m亿转换处发挥重要调控作用。它促使细胞越过控制点而完成GI亿转换使细胞增殖加快。大量实验表明cyclinDI与肿瘤发生发展关系密切，它在许多肿瘤中高表达，这一点已在淋巴瘤层腺癌、前列腺癌中得到证实。本组实验中cyclinDI在宫颈癌中明显高表达，其单独表达与鳞癌临床晚期及组织低分化有关，且与＊＊Ib宫颈癌的复发有相关性，5例 ·2·复发病例cyclinD均阳性表达，提示cyclinDI蛋白的表达关系到宫颈癌的不良预后，ul＊’‘’‘”‘是细胞周期依赖性激酶抑制蛋白＊DI)家族成员，其功能主要是通过抑制细胞周期调控因子＊DK)与细胞周期蛋白＊)形成cyclin—CDK复合物，负性调节 CDK功能，而发挥细胞增生抑制作用。rylwM‘几”’是目前已知具有最广泛激酶抑制活性的细胞周期抑制蛋白，它促使细胞停滞在GI期抑制细胞增殖，有利于细胞对损伤DNA修复。尽管nlw朴‘’‘”‘属于抑癌基因，然而在宫颈癌组织中P21w＊’几”’蛋白的表达明显高于正常宫颈组织中的表达。并且 P21＊’‘儿‘’‘的单独表达与宫颈癌的临床病理特征并无明显的相关性，提示 P21W”儿”’不能作为判断宫颈癌预后的指标。既往的基础研究结果表明由于Survivin能通过与 CDK4结合，从而阻止 PZlwM’“‘”发挥细胞增生抑制作用；cyclinDI也能能竞争抑制PZlw厂”“‘’‘的负性调节m乃转换点作用。关于三种蛋白的相互影响，本研究证实尽管Survivin或 cyclinD蛋白单独表达时与宫颈癌临床晚期及低分化有关，而当它们伴有 P21W”儿‘’‘蛋白表达时，却仅仅与低分化有关。一方面，单独 PZI＊”儿”‘蛋白的表达与宫颈癌临床病理特征无明显相关性，但 PZlwM’儿‘’‘在与 Survivin或 cyclinDI蛋白共表达时则与病理分化不良相关。而Survivin及cyclinDI蛋白的共表达同时与临床分期及病理分级有关。提示在宫颈癌中 PZlw扑‘儿‘’‘蛋白的表达可以影响 SllyyiVillJy＊ 二蛋白的功能，同时 p21wM‘儿”‘蛋白的功能也受到Survivin一 蛋白表达的影响，这一点与基础研究的结果相一致。5例复发病例100％S删ivin／cyclinDI 蛋白共表达，Survivin／cyclinDI蛋白共表达且与＊－IIb期的盆淋巴结转移有关，所以 Survivin／cyclinDI的共表达预示着宫颈癌有更不良的预后。 ·3· 结 论 Survivin及cyclinDI蛋白在宫颈癌的表达与临床晚期?