【摘 要】
:
本研究以西北农林科技大学园艺学院辣椒遗传育种课题组利用远缘杂交和诱变技术所选育的3个辣椒雄性不育材料3A、4A、5A及其相应的保持系3B、4B、5B为试材,基于同源序列的候选基因克隆的方法,分离并克隆到了与辣椒细胞质雄性不育相关的线粒体基因片段,利用反向PCR技术扩增其侧翼序列,并研究了雄性不育相关基因的转录表达情况。主要结果如下:1.建立一种利用辣椒叶片提取线粒体DNA(mtDNA)的方法。该方
【机 构】
:
西北农林科技大学 西北农林科技大学
论文部分内容阅读
本研究以西北农林科技大学园艺学院辣椒遗传育种课题组利用远缘杂交和诱变技术所选育的3个辣椒雄性不育材料3A、4A、5A及其相应的保持系3B、4B、5B为试材,基于同源序列的候选基因克隆的方法,分离并克隆到了与辣椒细胞质雄性不育相关的线粒体基因片段,利用反向PCR技术扩增其侧翼序列,并研究了雄性不育相关基因的转录表达情况。主要结果如下:
1.建立一种利用辣椒叶片提取线粒体DNA(mtDNA)的方法。该方法以辣椒幼嫩叶片为试材,采用差速离心和高盐萃取相结合的方法,分离叶片线粒体。然后利用SDS和蛋白酶K裂解线粒体,提取线粒体基因组。该方法无需培养黄化苗,试材供应充足,对试剂及仪器的要求低,一般实验室均可满足。该法分离提取的线粒体DNA经电泳和分光光度法测定,能满足分子生物学后续研究的要求。
2.基于同源序列的候选基因克隆的方法,以3个辣椒雄性不育材料线粒体基因组为模板,均扩增得到一条线粒体差异片段cms330。经克隆测序及序列分析表明,该片段与己报道的辣椒雄性不育相关基因orf456高度同源,核酸序列同源性高达99%,推测的蛋白质序列完全一致,表明3个辣椒雄性不育材料的不育分子机理可能与报道的辣椒分子机理相似。
3.利用反向PCR技术,扩增已知片段cms330的侧翼序列,得到一长约3kb的差异片段。经克隆测序及序列分析表明,cms330的上下游部分序列均与编码烟草NADH脱氢酶基因有80%以上的同源性,表明极有可能是cms330片段与线粒体NADH脱氢酶基因发生了重组。
4.提取3个辣椒不育材料和相应保持系叶片和花蕾的总RNA,研究了cms330的转录情况。结果显示,辣椒雄性不育相关基因片段cms330在3个辣椒不育材料中均表达,并且在叶片和花蕾中均会表达。
其他文献
肌原纤维蛋白(Myofibrillar protein,MP)是肌肉中含量最高的蛋白质,在肉制品加工中,其凝胶的形成直接决定产品的口感。磷脂是肉及肉制品中肌内脂质的主要成分,富含多不饱和脂肪酸,是形成风味化合物的主要前体。在肉糜制品加工过程中,磷脂与肌原纤维蛋白可能发生相互作用并影响肉类的品质,但目前肌原纤维蛋白与磷脂的互作机制及其对产品品质的影响还未见报道。本研究对肌原纤维蛋白热诱导凝胶形成前后
酸肉是西南地区一种具有地方特色的自然乳酸发酵猪肉制品,发酵这一方式既是酸肉风味品质形成的基础,也是酸肉保藏的方法。传统酸肉主要在冬季腌制,从发酵15天左右便开始食用,并以发酵的方式保藏,直至食用完毕,食用周期有时会长达半年以上。在自身酶系和微生物胞外酶系的影响下,酸肉中的蛋白质和脂质会被降解和氧化,加上长时间的微生物产酸和外加食盐的胁迫作用,其营养、安全以及食用品质必然会受到影响,甚至可能产生食品
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,“DON”),又称呕吐毒素,主要是由镰刀菌属所产生的一种次级代谢产物,其广泛存在于各种粮谷类原料及其制品中。长期摄入DON污染的食物会对人体以及动物的健康造成巨大的损害。目前关于去除DON的方法包括物理、化学以及生物方法。生物脱毒因具有效率高、特异性强、对饲料和环境无污染等优势,已成为食品安全领域的研究热点。DON的生物脱毒主要包括两个方面,一方面
低温贮藏是采后果蔬用于保鲜的一种重要方法,但桃果实本身是一种冷敏性果实,对低温非常敏感,长期贮藏在不适宜的低温下容易引起果实的冷害,从而失去商品和食用价值。本文以“白凤”水蜜桃为试材,研究了外源钙和钙调素拮抗剂处理对冷藏期间桃果实耐冷性的影响,并探讨了 Ca2+-CAM复合体减轻桃果实冷害的可能作用和机理,以期为桃果实采后保鲜技术提供理论依据。研究结果如下:1、研究了外源钙和钙调素拮抗剂处理对冷藏
Bacillomycin D是一类由芽孢杆菌属(Bacillus)产生的强抗真菌活性的脂肽,具有高效、安全、不产生耐药性、抑菌谱广以及易降解等特点。目前,Bacillomycin D在生物防治、抗氧化、抗肿瘤和真菌感染治疗等方面的应用和研究十分广泛。在真菌感染的治疗中,单一靶标的传统抗真菌药物会引起严重的副作用和耐药性,关于药物组合,特别是不同药物之间的协同作用研究已成为热点。Bacillomyc
本文采用以降低上部叶烟碱为目的的农业技术(试验一)和化学控制(试验二)两种措施对烤烟K326进行处理,研究了各因素对上部叶化学成分的影响效应。试验一结果表明:各处理上部叶的烟碱、总氮、蛋白质、还原糖、总糖、淀粉、K+含量及单叶重总体呈下降的趋势;三因素中以伤根面的影响最大,除淀粉外,伤根面对其余化学成分的影响都达显著以上。留叶数和采收方式只对烟碱或石油醚提取物有所影响。试验二结果表明:各处理上部叶
杂交水稻种子纯度是保证水稻高产的前提。具备快速、简便、经济、准确的种子纯度检测方法是合格杂交水稻种子供应的保证。本论文选用生产上主推的2个杂交组合汕优63F1、特优559F1以及它们相应的不育系和恢复系作为试验材料,对它们的不完全叶长度分布进行了研究;同时对6个杂交组合特优559、Ⅱ优559、Ⅱ优084、协优084、丰两优1号、两优培九的F1以及它们各自的亲本之间的SSR多态性进行了研究。主要
本文通过2003和2004年的田间试验及室内分析,对地理远缘大豆杂交F4、F5和回交BCF3、BCF4的大豆株型性状、生理性状及产量性状进行了初步的比较研究,主要结果如下:1.株型性状表现:株高这一性状在后代中表现更倾向于父本。F4的株高由美国品种作父本的组合高于中国品种作父本的组合。BCF3株高的遗传表现是用美国品种回交好于中国品种。2、生理性状表现:从各组合看,正反交间叶绿素含量在F4代的