百合杂种的细胞学分析及组培扩繁技术的研究

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百合(Lilium)是世界重要的观赏花卉,我国作为百合资源之乡,培育具有自主知识产权的百合新品种是育种工作者的重要研究方向。本研究以新铁炮百合×东方百合杂种系品种以及新铁炮百合×亚洲百合杂种系品种为材料进行了细胞学鉴定。首先,采用不同的预处理液和解离液,探索了影响染色体制片的关键因素。其次,对东方百合、亚洲百合、新铁炮百合的部分品种进行染色体核型研究,分析不同杂种系的染色体形态特征,探索其特异结构;在此基础上,对获得的杂交后代进行了细胞学鉴定。此外,以组培杂种苗为试验材料,对不同基因型的杂种苗进行了增殖和鳞茎膨大研究。该研究对于百合杂种的鉴定及新品种培育具有重要的理论意义和实际应用价值。本研究主要研究结果如下:   1、建立了百合染色体制片技术。在取材方面,百合茎生根比基生根更适用于核型研究;预处理液选用0.7mM放线菌酮处理6h,染色体收缩程度高,适用于核型研究;预处理液采用冰水混合物处理48h,染色体收缩程度适中,适用于带型研究;解离液采用盐酸和乙醇的混合液,能使根尖短时间内得到解离,适用于百合核型研究。   2、分别对东方百合、亚洲百合、新铁炮百合进行了核型分析,结果显示:次缢痕位置和亲本染色体的核型类型可以作为杂种鉴定的依据。在不同百合品种系内的核型分析方面,新铁炮百合和不同杂种系的亲本杂交获得的后代染色体特征具有一定的相似性。其中,新铁炮百合×东方百合杂种的第5、6条染色体均带有次缢痕。新铁炮百合×亚洲百合杂种的第13-15条染色体多带有次缢痕。新铁炮百合染色体类型多为亚中着丝粒型,但新铁炮百合×亚洲百合杂种的染色体类型中着丝粒型也占据较大比例,与父本类似。以上特征均可用于鉴定杂种的指标。   3、由于基因型的不同,杂种的增殖速度以及鳞茎膨大程度存在不同。通过正交试验,筛选出新铁炮百合×东方百合杂种系的杂种苗适宜的增殖培养基生长调节剂种类及浓度为MS+1.5 mg· L-16-BA+0.5 mg· L-1 NAA+0.1 mg·L-1水杨酸+30 g·L-1蔗糖;鳞茎膨大培养基组成为MS+15 mg·L-1多效唑+1 mg·L-16-BA+80 g·L-1蔗糖。新铁炮百合×亚洲百合杂种系的杂种苗适宜的增殖培养基的成分为MS+1.5 mg·L-16-BA+0.1mg·L-1 NAA+0.5 mg·L-1水杨酸+30 g·L-1蔗糖,鳞茎膨大培养基的生长调节剂浓度和种类为MS+10 mg·L-1多效唑+1000 mg·L-1活性炭+80 g·L-1蔗糖。
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