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金钗石斛(Dendrobium nobile Lind1)是一种同时具有观赏和药用价值的兰科石斛属植物，有较大的开发潜力，而组织培养技术是实现金钗石斛大规模快速繁殖的重要手段。本文以金钗石斛成熟茎段和幼嫩茎段为外植体，对组织培养各阶段进行了系统的研究，成功建立了金钗石斛的组织培养体系。鉴于多倍体植物具有器官巨大、抗逆性强和生化物质含量高等特点，多倍体育种成为金钗石斛遗传改良的主要途径之一。本文用秋水仙素处理不定芽进行多倍体诱导，并与二倍体进行了比较，初步建立了一套适合金钗石斛的多倍体诱导和鉴定方法。主要结果如下： 1.金钗石斛组织培养体系的建立： (1)以成熟茎段为外植体，对3种消毒方法进行了比较。结果表明：先用75％酒精处理30s，再用0.1％升汞消毒8min的消毒效果最好，成活率可达28％。 (2)成熟带节茎段在1/2MS+6-BA1.0mg/L的培养基中腋芽萌发率最高，可达6.67％；成熟茎段很难脱分化。 (3)最适合金钗石斛幼嫩茎段腋芽萌发的培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L+KT1.5mg/L，萌发率达88％。 (4)最适合幼嫩茎段愈伤组织诱导的培养基为1/2MS+NAA1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+KT0.5mg/L，诱导率达16％。 (5)愈伤组织增殖的最适培养基为1/2MS+NAA1.0mg/L+6-BA0.5mg/L，增殖倍数达6.42。 (6)愈伤组织分化的最适培养基为1/2MS+NAA0.2mg/L+6-BA2.0mg/L。 (7)最适于不定芽生根的培养基为1/2MS+NAA1.0mg/L+6-BA0.2mg/L+AC1.0g/L，生根率达90％，添加活性炭可提高石斛的生根率，改善根的质量。 2.金钗石斛多倍体的诱导及鉴定： 把组培产生的不定芽经一定浓度的秋水仙素溶液浸泡一定时间后再培养，或者把不定芽接种在添加一定浓度的秋水仙素培养基中，均可诱发金钗石斛多倍体的产生，但以前者效果为好。当将不定芽在添加了2％DMSO的0.1％秋水仙素溶液中浸泡24h时，诱变率最高，为37.5％。金钗石斛多倍体与二倍体在外形上有明显区别，多倍体植株茎矮、粗壮、叶片厚、叶色浓绿，且生长发育缓慢。多倍体株与二倍体植株相比，气孔增大，单位面积气孔数目减少，而保卫细胞内叶绿体数目明显增多，这一点可以作为染色体计数前多倍体初级筛选的标准。对金钗石斛组培苗的根尖细胞进行改良苯酚品种染色，压片，测得二倍体细胞的染色体数目为2n=2x=38，而四倍体细胞的染色体数目则为2n=4x=76。