甜菜夜蛾白僵菌优良菌株的筛选及发酵技术的研究

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 10次 | 上传用户:rongerxingfu
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本试验在初筛获得的9株球孢白僵菌菌株的基础上,通过对毒力、产孢量、生长量、胞外蛋白酶活性、抗紫外能力,水浴活性等指标的测定,对它们在多种条件下的性状进行了比较,并结合毒力测定的结果,以球孢白僵菌为研究对象,进行多指标灰色评价,将最优化的菌株BD-B015作为标准菌株,以其毒力与各菌株相比较,得到各个菌株的毒力效价。筛选出两株对甜菜夜蛾具有高毒力且性状优良的菌株BD-B015、BD-B198。试验用筛选出的菌株BD-B015对常见蔬菜害虫做了初步的侵染试验,目的在于评价该菌株对常见害虫的兼控作用及在生产中的应用潜力。通过对蚜虫及常见鳞翅目害虫的杀虫效果比较,除黏虫外,甜菜夜蛾、棉铃虫、小菜蛾、菜青虫、蚜虫均能感病,其中以甜菜夜蛾最为敏感,LC50为2.05×106个孢子。试验就生产中常用的几种农药对白僵菌的影响及菌药混用防治技术进行了初步研究,选用了10种常见化学农药既包括杀菌剂,又包括杀虫剂,还有植物生长调节剂赤霉素,每种供试药剂进行了5个浓度的梯度处理,分别为1000 mg/L、500 mg/L、250 mg/L、125 mg/L、62.5 mg/L;杀菌剂对菌株BD-B015的孢子萌发和菌丝生长存在显著的抑制作用,最高浓度下停止生长,最低浓度的抑制率也在75%以上;杀虫剂也对菌株BD-B015菌丝生长及孢子萌发存在不同程度的抑制作用。以产孢量和菌丝生物量为指标,研究了不同液体培养基对白僵菌生长的影响;结果显示:在8种液体培养基中,H、F较为适宜液体培养,其中H培养基最为经济实用。F培养基最适合球孢白僵菌BD-B015的发酵培养,其组成为:葡萄糖4g、酵母粉1g、蛋白胨1g、K2HPO4 0.1g、MgSO4 0.1g、Kcl 0.1g。通过对发酵条件的研究确定了其主要的发酵条件,即温度25~30℃,100~200ml/500 mL装量,170 r/min振荡培养120~144h。试验表明,不同基质对白僵菌生物量影响显著,营养成份复杂的基质有利于白僵菌芽孢子的产生和总的生物量的提高,如本试验选出的培养基H。培养过程中二级液体培养液接种量以固体培养料的30%~40%最优,固体配方不同,最优接种量也不同,实际应用过程中应先进行接种量的优化,以达到降低成本获得最优效果的目的。单纯的以麦麸为培养基质可以获得较高产孢量,在麦麸中加入麦糠或玉米秆粉碎物,可增大通气性,并且降低成本,扩大培养来源,为白僵菌的普及及推广应用打下基础;从试验结果看,麦麸和麦糠的混合物产孢量最高,产孢量为187.69×108个/g。麦麸浸提液的残渣的二次利用作为固体培养基质,其产孢量仍可达到110.85×108个/g,充分利用了各培养基质。
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