双酚类化合物广泛应用于各种工业产品和日常消费品,可与多种内源性受体结合,干扰内源性激素的合成和代谢,引起代谢紊乱。胚胎期和出生后双酚A（bisphenol A,BPA）的暴露可导致机体产生胰岛素抵抗进而引起代谢障碍。双酚类化合物存在于脐带血和母乳中,可能对后代产生长远的影响。骨骼肌的发育开始于胚胎期形成于胎儿期,作为胰岛素最大的靶组织,在维持葡萄糖稳态和机体能量平衡中起着重要作用。双酚类化合物对骨骼肌发育的影响鲜有报道。本研究用双酚类化合物处理妊娠期母羊,从体内和体外两个层面研究其对胎儿骨骼肌发育的影响,探究其作用机制。选取妊娠绵羊（N=78只/处理组）为体内试验研究对象,在妊娠第30100 d每日背部皮下注射BPA或双酚S（bisphenol S,BPS）（0.5 mg/kg/d）。妊娠第120 d,屠宰母羊采集胎儿后肢上部骨骼肌组织通过HE染色法检测肌纤维横截面面积,q RTPCR法检测肌纤维类型决定基因、成肌调节因子基因和肌纤维大小相关基因的表达,Western blotting法检测肌纤维类型相关蛋白的表达。同时,采集妊娠第120 d的胎羊新鲜骨骼肌组织,体外分离纯化培养成肌细胞,用Ed U法检测其增殖能力,免疫荧光染色法检测其诱导分化后形成肌管的大小。另外,选取小鼠C2C12成肌细胞和大鼠L6成肌细胞作为体外研究模型进行了研究,用MTT法检测其细胞毒性,Ed U法检测其增殖能力,免疫荧光染色法检测其诱导分化形成的肌管大小,Western blotting法检测胰岛素刺激前后C2C12和L6成肌细胞和分化后肌管细胞中胰岛素信号通路关键因子的表达。主要研究结果如下:1.动物试验体内研究结果:（1）BPA和BPS处理组的公胎羊和母胎羊肌纤维面积均大于对照组。（2）肌纤维类型决定基因MYH1在BPA处理组母胎羊骨骼肌组织中高表达,MYH2和MYH7在BPS处理组母胎羊骨骼肌组织中高表达,但在不同处理组公胎羊骨骼肌组织中表达差异不显著（P>0.05）。（3）促进肌纤维肥大因子（JUNB）、成肌细胞融合启动子（My D88）和成肌调节因子基因（Myf5、Myog、MyoD和MRF4）mRNA均在BPS处理组的母胎羊骨骼肌组织高表达,但在不同处理组公胎羊骨骼肌组织中表达差异不显著（P>0.05）。（4）快收缩蛋白（fast MHC）在对照组、BPA和BPS处理组的母胎羊骨骼肌组织中高表达（P<0.05）,慢收缩蛋白（slow MHC）只在BPS处理组的母胎羊骨骼肌组织中高表达（P<0.05）。2.动物试验体外研究结果:（1）BPA和BPS处理的公胎羊和母胎羊成肌细胞诱导分化后平均肌管面积和肌管直径均显著大于对照组;所有处理组的母胎羊成肌细胞分化形成的肌管面积均显著大于公胎儿（P<0.05）。（2）BPA和BPS处理对胎羊成肌细胞增殖能力和胰岛素反应性没有显著性影响（P>0.05）。3.体外成肌细胞系研究结果:（1）C2C12细胞和L6细胞分别经11个剂量的BPA、BPS或双酚F（bisphenol F,BPF）处理72 h后,C2C12细胞对双酚类化合物有更强的敏感性,三种双酚类化合物对成肌细胞毒性作用强度依次为BPA>BPF>BPS。（2）10-4 M、10-6 M、10-8 M和10-10 M BPS和BPF处理C2C12细胞8 d后,仅10-4 M BPF处理组促进了C2C12成肌细胞的增殖,所有处理组均促进了C2C12成肌细胞的融合。（3）非细胞毒性剂量（10-5 M）BPA、BPS和BPF处理C2C12细胞和L6细胞5 d后,BPS和BPF处理组p-AKT（Thr）和p-GSK-3β的表达水平降低（P<0.05）,但是下游因子mTOR和GLUT4的表达没有显著性差异（P>0.05）。综上所述,绵羊妊娠期第30100 d每日连续注射BPA或BPS可导致120胎龄的胎儿肌纤维横截面增加,诱导分化后的肌管面积更大,引起胎儿骨骼肌肥大且不存在性别特异性。小鼠C2C12成肌细胞是研究双酚类化合物对骨骼肌发育影响更敏感的体外模型。BPS和BPF处理可降低胰岛素受体信号通路关键因子p-AKT（Thr）和p-GSK-3β的表达,但不影响信号通路终端因子mTOR和GLUT4的表达,不损害成肌细胞对胰岛素的反应性,但是干扰了胰岛素信号通路前端部分因子的表达,其应用于工业生产的安全性有待进一步研究。