维药阿里红多糖的分离纯化其体外抗氧化活性研究

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目的:1)分离纯化维药阿里红多糖,对阿里红多糖组分进行初步解析;2)并探究了阿里红多糖的的体外抗氧化活性及其对DNA氧化损伤的保护作用。方法:1)采用纤维素阴离子交换柱色谱、琼脂糖凝胶和葡聚糖凝胶等色谱填料进行阿里红多糖组分分离纯化。2)采用凝胶过滤法、紫外法和聚丙烯酰胺凝胶电泳分析法鉴定阿里红多糖的纯度,并采用凝胶过滤法测定阿里红多糖的分子量。3)采用GC、GC-MS、IR、NMR等现代色谱、光谱技术,结合酸水解、部分酸水解、甲基化、高碘酸氧化和Smith降解等经典化学方法进行多糖组分的结构分析。4)通过测定多糖对DNA氧化损伤的保护作用以及对DPPH,羟基自由基,超氧阴离子的清除、还原能力来评价阿里红多糖的抗氧化活性。结果:1)从阿里红粗多糖中分离得到FOPS-a和FOPS-b两个组分。2)多糖组分FOPS-a平均分子量为199 kDa,由葡萄糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖和半乳糖组成,其摩尔比为0.012∶1∶1.90∶2.38∶6.25;多糖FOPS-a是由1,3,6-半乳糖、1-葡萄糖为主要连接,同时含有1,2-木糖、1-甘露糖残基、1,2,6-甘露糖,1,3-半乳糖等分支;多糖组分FOPS-b平均分子量为87kDa,由阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、木糖和半乳糖组成,摩尔比为1∶2.01∶0.93∶1.24∶4.3;由甲基化和部分酸水解分析得知FOPS-b是由1,4-半乳糖、1,6-葡萄糖、1,4-甘露糖为主要连接,同时含有1,6-甘露糖、1,3-葡萄糖、1,3,6-半乳糖、1,4-半乳糖等分支。3)抗氧化的实验结果表明,阿里红粗多糖及组分具有铁离子还原能力,清除羟基自由基、DPPH自由基、超氧阴离子能力;紫外分光光度法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法研究,表明阿里红粗多糖及组分对·OH自由基引起的DNA氧化损伤具有一定的保护作用。结论:1)从阿里红中分离纯化得到两个多糖组分FOPS-a和FOPS-b,经组分分析可知两种组分FOPS-a和FOPS-b均为带支链多糖,两种多糖组分单糖组成、各糖的链接顺序及糖苷键类型存在差异。2)抗氧化活性研究表明阿里红多糖具有一定的体外抗氧化活性,为阿里红多糖结构与活性的深入研究提供了基础,也为阿里红的综合利用提供了参考。
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