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抗菌肽由于其特殊的作用机理和功效,使其在解决传统抗生素的药物残留和菌株耐药性问题方面显示了巨大潜力。但与传统抗生素相比,某些抗菌肽的抗菌活性还不够理想,这就需要结合抗菌肽活性与结构的关系有目的地对其进行改造和设计。本文应用抗菌肽分子设计的一些理论与方法将本实验室保有的Moricin,Cecropin昆虫抗菌肽基因进行了人工设计与改造,合成了新的Moricin-Cecropin杂合肽基因序列,以期获得抗菌谱更广,活性更强的重组抗菌肽分子。为了获得小分子杂合肽的高效可溶性表达,本实验将杂合肽基因与泛素基因序列融合分别克隆到大肠杆菌表达载体PQE30,pET21a和pET32a中进行重组抗菌肽基因的融合表达研究。为了不影响成熟肽的结构与功能分析,杂合肽基因序列的合成及其与泛素基因的融合都是通过重叠延伸PCR法合成的。同时对泛素羧基端水解酶YUH1成功克隆、表达与纯化,解决了泛素融合蛋白的酶切问题,为以后泛素融合表达外源基因的去泛素化提供了很好的工具酶。