【摘 要】
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小麦具有独特的加工品质,主要由种子储藏蛋白决定。高分子量谷蛋白（HMW-GS）是决定小麦加工品质的关键储藏蛋白类型。Tab HLH33属于b HLH（basic helix-loop-helix）转录因子家族,它能直接结合HMW-GS 1Bx7的启动子并提高其转录水平。完善Tab HLH33调控HMW-GS表达的分子机制对认识小麦加工品质的形成机制和分子育种具有重要价值。本实验利用酵母双杂交筛选到
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小麦具有独特的加工品质,主要由种子储藏蛋白决定。高分子量谷蛋白（HMW-GS）是决定小麦加工品质的关键储藏蛋白类型。Tab HLH33属于b HLH（basic helix-loop-helix）转录因子家族,它能直接结合HMW-GS 1Bx7的启动子并提高其转录水平。完善Tab HLH33调控HMW-GS表达的分子机制对认识小麦加工品质的形成机制和分子育种具有重要价值。本实验利用酵母双杂交筛选到与Tab HLH33互作的转录因子TaGRF1,并通过一系列实验证明TaGRF1通过与Tab HLH33互作负调控HMW-GS 1Bx7的表达。主要结果列举如下:1.提取普通小麦品种蜀麦482不同发育阶段种子的RNA,等量混合后构建酵母双杂交c DNA文库。构建酵母载体p GBKT7-Tab HLH33,筛选c DNA文库,获得与Tab HLH33互作的转录因子TaGRF1。2.克隆TaGRF1的全长c DNA序列,连接到p C2300-35S-e GFP载体,转化农杆菌后注射烟草叶片,共聚焦显微镜观察发现TaGRF1定位于细胞核。3.荧光定量PCR实验和SDS-PAGE检测表明1Bx7表达量的提高伴随着TaGRF1和Tab HLH33表达量的变化。4.酵母双杂交实验证明Tab HLH33能够自身互作形成同源二聚体。5.酵母双杂交和双分子荧光互补实验证明TaGRF1与Tab HLH33在细胞核互作。6.荧光素酶报告基因（Luciferase）烟草瞬时表达实验结果表明,TaGRF1与Tab HLH33的互作抑制Tab HLH33对HMW-GS 1Bx7的转录激活。综上,TaGRF1与Tab HLH33互作抑制Tab HLH33对1Bx7亚基的转录激活。
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