基于恶/噻嗪的荧光探针在阿尔茨海默症检测中的应用研究

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阿尔茨海默症(AD)是一种特别常见的神经退行性疾病,严重损害老年人群的身心健康。虽然,目前AD的发病机制尚不清楚,但许多研究者提出了一系列相关性的病理假说,包括淀粉样级联假说、氧化应激假说和金属稳态失衡假说等。荧光探针由于其价格低廉、合成简单、使用方便和响应速度快等优点而被广泛应用于AD病理性蛋白的检测。此外,相关证据表明AD的发病机制与活性氧(ROS)和铜(Ⅱ)离子密切相关,针对活性氧和铜(Ⅱ)离子的检测以及探索其与AD的相关性就显得格外重要。次氯酸(HOCl)是最为常见的一种活性氧,在AD的大脑中广泛存在。因此,开发能够快速检测HOCl和Cu2+的高选择性和灵敏性的荧光探针成为当下的研究热点。首先,我们利用恶嗪1的还原形式和氧化形式之间荧光的显著变化设计并合成了两个荧光探针BC-2和BC-3,用于特异性检测HOCl。探针BC-2和BC-3在HOCl存在下能够释放出荧光团恶嗪1,并伴随着近红外荧光强度的显著增加和溶液颜色从无色到蓝色的变化。值得注意的是,探针BC-3在细胞和小鼠模型中对HOC1均表现出高的选择性、高的灵敏度和快速的响应能力。随后,我们开发了基于恶嗪1的荧光探针BC-1对Cu2+进行选择性检测。探针BC-1显示出良好的水溶性、高选择性和出色的灵敏性,其检测极限为1.93 nM。值得注意的是,探针BC-1能够渗透细胞膜并检测活细胞中的Cu2+,这表明探针BC-1在生物系统中具有检测分析物的巨大潜力。尽管尚不清楚AD的病理,但两种病理性标志物(Aβ和Tau)是了解AD疾病进展的关键。亚甲基蓝(methylene blue,MB)作为一种光敏剂能够在650 nm红光照射下产生高活性单线态氧(1O2),从而导致Aβ聚集体解聚并降低其生物毒性。此外,亚甲基蓝也是抑制Tau聚集的小分子化合物。因此,我们通过酰胺键将MB的还原形式和苯胺相连,构建了荧光探针MB-2和MB-3。其中,探针MB-3对HOCl具有高选择性,并且各种物质对其检测干扰较小。更重要的是,探针MB-3在HOCl存在下释放的荧光团MB能够有效抑制Tau聚集并能够解聚Aβ42的聚集体。
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