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目的:通过体外研究LHRH-PE40对卵巢癌SK细胞增殖和凋亡的影响,来验证LHRH-PE40是否能用于卵巢癌的治疗研究。方法:1.体外细胞培养技术结合细胞毒实验,观察LHRH-PE40对卵巢癌细胞系增殖的影响。将LHRH-PE40进行8个梯度稀释,后依次加入各孔中,于加药后1-5天,每天在倒置显微镜下观察细胞抑制率;同时进一步对细胞培养板进行结晶紫染色,A570nm测定各处理孔和对照孔的光密度值,计算LHRH-PE40对SK细胞的IC50。2.用免疫组化方法对LHRH-PE40终浓度为1ug/ml条件下培养48h的SK细胞进行免疫组化染色,比较用药前后Ki-67、bcl-2阳性率的变化。3.用流式细胞仪测定加药后细胞凋亡率及各个周期细胞比率的变化。结果:1.LHRH-PE40可以有效抑制体外培养卵巢癌SK细胞的生长,LHRH-PE40对卵巢癌SK细胞增殖抑制存在时间、浓度的依赖性。通过量效曲线和时效曲线可以看出,LHRH-PE40的最小有效剂量为0.625μg/ml;最佳作用时间为加药后48-72h,半数致死浓度为0.558μg/ml。2.在加药后药物浓度为1μg/ml的条件下,发现用药后癌细胞中的Ki-67阳性细胞(用药前73%,用药后25%)及Bcl-2阳性细胞(用药前92%,用药后43%)比率均下降,凋亡细胞比率增加(由0.8%增加到3.6%),提示LHRH-PE40作用后癌细胞增殖活动受到抑制,而细胞凋亡活动加强。流式细胞仪检测,在1.0μg/ml浓度下,细胞的G0/G1期细胞比率增加;S期细胞比率增加,而G2/M期减少。这说明LHRH-PE40影响癌细胞蛋白的合成的同时可促进肿瘤细胞凋亡,进而抑制癌细胞的增殖。综上,LHRH-PE40可靶向性杀灭卵巢癌细胞;同时促进凋亡作用,LHRH-PE40引起卵巢癌细胞周期分布变化,使细胞停滞于G0/Gl期的细胞比例增大,阻碍有丝分裂的进行使凋亡率明显增高。LHRH-PE40对卵巢癌细胞增殖抑制和促进凋亡作用对剂量和时间存在依赖性。此实验为LHRH-PE40:冶疗卵巢癌提供实验依据。