重组免疫毒素LHRH-PE40融合蛋白对卵巢癌细胞增殖与凋亡的影响

来源 :吉林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:daidaide21
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:通过体外研究LHRH-PE40对卵巢癌SK细胞增殖和凋亡的影响,来验证LHRH-PE40是否能用于卵巢癌的治疗研究。方法:1.体外细胞培养技术结合细胞毒实验,观察LHRH-PE40对卵巢癌细胞系增殖的影响。将LHRH-PE40进行8个梯度稀释,后依次加入各孔中,于加药后1-5天,每天在倒置显微镜下观察细胞抑制率;同时进一步对细胞培养板进行结晶紫染色,A570nm测定各处理孔和对照孔的光密度值,计算LHRH-PE40对SK细胞的IC50。2.用免疫组化方法对LHRH-PE40终浓度为1ug/ml条件下培养48h的SK细胞进行免疫组化染色,比较用药前后Ki-67、bcl-2阳性率的变化。3.用流式细胞仪测定加药后细胞凋亡率及各个周期细胞比率的变化。结果:1.LHRH-PE40可以有效抑制体外培养卵巢癌SK细胞的生长,LHRH-PE40对卵巢癌SK细胞增殖抑制存在时间、浓度的依赖性。通过量效曲线和时效曲线可以看出,LHRH-PE40的最小有效剂量为0.625μg/ml;最佳作用时间为加药后48-72h,半数致死浓度为0.558μg/ml。2.在加药后药物浓度为1μg/ml的条件下,发现用药后癌细胞中的Ki-67阳性细胞(用药前73%,用药后25%)及Bcl-2阳性细胞(用药前92%,用药后43%)比率均下降,凋亡细胞比率增加(由0.8%增加到3.6%),提示LHRH-PE40作用后癌细胞增殖活动受到抑制,而细胞凋亡活动加强。流式细胞仪检测,在1.0μg/ml浓度下,细胞的G0/G1期细胞比率增加;S期细胞比率增加,而G2/M期减少。这说明LHRH-PE40影响癌细胞蛋白的合成的同时可促进肿瘤细胞凋亡,进而抑制癌细胞的增殖。综上,LHRH-PE40可靶向性杀灭卵巢癌细胞;同时促进凋亡作用,LHRH-PE40引起卵巢癌细胞周期分布变化,使细胞停滞于G0/Gl期的细胞比例增大,阻碍有丝分裂的进行使凋亡率明显增高。LHRH-PE40对卵巢癌细胞增殖抑制和促进凋亡作用对剂量和时间存在依赖性。此实验为LHRH-PE40:冶疗卵巢癌提供实验依据。
其他文献
高校创业教育的管理创新是深化高校创业教育改革的必由之路。基于麦肯锡7S模型,归纳出高校创业教育管理具有专业化、国际化、共享化、市场化特征,提出以创新人才培养战略实现
研究背景卵巢上皮性癌为最常见的卵巢恶性肿瘤,该病发展迅速,不易早期诊断,一旦出现症状多属晚期,治疗困难,预后差,死亡率居妇科恶性肿瘤首位,目前治疗上主要是手术和以铂类
生物学课堂教学目标是优化教学方法和评价课堂教学效果的尺度。本文从我国目前生物学课堂教学目标表述的实际情况出发,探讨了教学目标的分类及其表述,并在此基础上对目前存在的
随机抽取2014年3~8月的住院病房用药处方,统计出含有缓控释制剂的处方,缓控释制剂的例次及不合理用药的例次,对其进行分析总结,通过药师的临床干预,使缓控释制剂的使用趋于合
目的:探讨姜黄素(curcumin)对人脑胶质瘤U-251细胞ATP酶的影响及诱导胶质瘤细胞凋亡的机制。方法:分别用20、40、80和100 umol/L姜黄素处理U-251细胞24h,用MTT法测定姜黄素对
构建了县域现代农业发展测评体系,并对沈阳一市三县的辽中、康平、法库和新民进行了现代农业发展测评。结果表明,辽中、康平和法库均处于现代农业的起步阶段,新民市已经进入
期刊
本文用热重法考察了三种不同孔道结构的分子筛(SAPO-34,SAPO-5,HZSM-5)在乙醇转化为低碳烯反应过程中的积炭行为,以及经钾、镁的化合物改质的SAPO-34分子筛在该反应过程中的抗积炭能力。用氨程序升温脱附法(TPD)研
采用直流电弧等离子法可以制备出包含有a和β相,尺寸约为70 nm的纳米氧化铋粉体,收率可达30%。利用制备的纳米氧化铋粉体替代微米级材料制备氧化锌压敏陶瓷后,研究了其对器件
<正>9月14日李克强总理主持召开国务院常务会议提出:要大力发展钢结构、混凝土等装配式建筑。同日李克强在京出席第39届国际标准化组织大会中提到,标准化水平的高低,反映了一