背景:已有报道,超声微泡能明显提高增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染体外培养的视网膜神经节细胞的效率。目的:验证超声微泡介导EGFP基因能否在体内成功转染视网膜神经节细胞(RGCs),是否比传统的转染方式效率高以及这种转染方式是否损伤RGCs。设计、时间及地点:基因形态学观察实验,于2008-01/07在重庆医科大学超声影像学研究所实验室完成。方法:将SD大鼠50只随机分为4组:正常对照组(n=5)、单纯质粒组(n=15)、质粒+超声组(n=15)、超声微泡组(n=15)。正常对照组玻璃体腔注射5μL生理盐水;单纯质粒组:注射5μL质粒;质粒+超声组:注射5μL质粒后,立即用0.5 W/cm2超声波辐照大鼠眼球60 s,工作时间控制为1/3(即辐照5 s,停10 s,共60 s,其中辐照时间20s,);超声微泡组:注射质粒微泡混悬液5μL后,立即用前述同等能量超声波辐照大鼠眼球。7 d后,取大鼠眼球制作视网膜铺片、冰冻纵切片及视网膜EGFP mRNA的RT-PCR。主要观察指标:用荧光显微镜观察铺片及切片中EGFP在RGCs的表达情况。用RGCs计数观察RGCs损伤情况[1-2]。用RT-PCR对EGFP mRNA进行半定量检测。结果: 1.超声微泡组转染EGFP基因的效率明显高于其他试验组。2.超声微泡介导EGFP基因转染RGCs的转染方法对RGCs无明显损伤。结论:在低频超声波的照射下,超声微泡能够在体内安全、有效地介导EGFP基因转染RGCs。