【摘 要】
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目的:本论文从动物实验和分子水平来阐述芩百清肺浓缩丸及其中有效活性成分黄芩苷与TRPA1、CGRP、SP咳嗽因子表达的影响作用,以抑制咳嗽因子TRPA1、CGRP、SP蛋白表达影响为依据,解析阐述芩百及其活性成分黄芩苷抑制肺炎支原体肺炎咳嗽的作用,为其深度开发提供理论和实验根据,用于补充治疗肺炎支原体肺炎咳嗽临床药物的依据。方法:Biacore T200垂钓法,可富集、筛选和回收芩百清肺浓缩丸中亲
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目的:本论文从动物实验和分子水平来阐述芩百清肺浓缩丸及其中有效活性成分黄芩苷与TRPA1、CGRP、SP咳嗽因子表达的影响作用,以抑制咳嗽因子TRPA1、CGRP、SP蛋白表达影响为依据,解析阐述芩百及其活性成分黄芩苷抑制肺炎支原体肺炎咳嗽的作用,为其深度开发提供理论和实验根据,用于补充治疗肺炎支原体肺炎咳嗽临床药物的依据。方法:Biacore T200垂钓法,可富集、筛选和回收芩百清肺浓缩丸中亲和活性成分,并且通过UPLC-Q-TOF/MS对回收得到样品进行质谱分析及鉴定。利用肺炎支原体感染C57小鼠建立支原体感染模型,采集感染后小鼠肺组织,HE染色后观察肺组织形态变化,并运用RT-PCR和免疫组化方法检测小鼠肺组织给药前后咳嗽因子TRPA1、CGRP、SP的蛋白表达水平变化及m RNA表达变化。结果:经过Biacore T200垂钓后分析出结果,显示有效成分为黄芩苷作为芩百清肺浓缩丸中的有效活性成分,随后通过UPLC-Q-TOF/MS法检测并加以分析,核实查验已有数据库,结果表明其活性成分确为黄芩苷。HE实验染色结果表明黄芩苷给药组的肺组织形态,比较模型组有明显好转。Real-time PCR实验结果显示,与模型组相比较黄芩苷给药组可降低TRPA1、CGRP与SP的m RNA表达。免疫组织化学法实验数据结果表明,与模型组相比较,黄芩苷给药组的TRPA1、CGRP与SP蛋白表达量明显降低。结论:本实验利用生物分子相互作用仪（Biacore T-200）钓取和鉴定了芩百清肺浓缩丸中的活性成分黄芩苷,相关的药理实验也验证了黄芩苷能抑制咳嗽因子TRPA1、CGRP、SP表达。本实验显示,芩百清肺浓缩丸中有效活性成分黄芩苷可有效抑制肺炎支原体感染后的咳嗽,揭示芩百清肺浓缩丸可通过其有效成分黄芩苷治疗支原体肺炎的中药药效物质基础和作用机理,促进药物研发,具有科学意义和应用前景。
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