肥胖2型糖尿病气阴两虚兼痰湿证患者肠道菌群特征分析

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:miaoyuan3660346
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目的:本研究旨在分析对比肥胖2型糖尿病气阴两虚兼痰湿证患者与正常人群肠道菌群的组成差异,以期发现其特有的菌群结构特征、代表菌种以及相关的潜在代谢通路。资料与方法:本研究选取2021年3月至2021年10月辽宁中医药大学附属医院内分泌科病房的肥胖2型糖尿病气阴两虚兼痰湿证患者20例作为观察组;同时在沈阳市内招募健康志愿者,选取与观察组性别、年龄相匹配的19例志愿者作为正常对照组(简称正常组),收集粪便样本。比较两组一般资料及中医证候评分,粪便样本则提取DNA建库,运用16S r DNA对通用的V3-V4靶区的保守区进行PCR扩增及高通序测序分析,对两组肠道菌群的组成及菌群代谢通路进行分析比较。结果:1.本研究共得到序列集合(OTU)数目957个,物种稀释曲线与rank丰度曲线皆表明本研究所收集的样本量充足。2.两组菌群物种组成及差异,在门水平上,以厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门和放线菌门等为主,但它们组间差异无统计学意义(P>0.05);在科水平上,以毛螺菌科、瘤胃菌科、肠杆菌科、拟杆菌科、双歧杆菌科、韦荣氏菌科、阿克曼氏菌科、丹毒丝菌科、普雷沃氏菌科、理研菌科等为主,其中观察组的丹毒丝菌科的相对丰度显著高于正常组(P<0.05);在属水平上,以粪杆菌属、埃希氏菌-志贺菌属、拟杆菌属、双歧杆菌、布劳特氏菌属、阿克曼菌属、罕见小球菌属、巨单胞菌属、扭链瘤胃球菌属、另枝菌属等为主,其中观察组的巨单胞菌属的相对丰度显著高于正常组(P<0.05),另枝菌属的相对丰度显著低于正常组(P<0.05)。3.Alpha多样性指数分析结果显示,观察组各指数均低于正常组,其中sobs、Chao1、ACE、Shannon、Pielou’s evenness指数差异有统计学意义(P<0.05),Simpson、PD-whole tree指数差异无统计学意义(P>0.05)。4.Beta多样性分析采用不同算法(包括UPGMA聚类树、PCo A分析),结果表明两组肠道菌群在群落组成及结构均存在一定差异,综合Anosim检验,得出两组群落构成差异具有统计学意义(P<0.05)。5.LEf Se分析结合随机森林分析发现,观察组具有显著影响的差异物种分别为巨单胞菌属、脆弱拟杆菌、Bacteroides_stercoris_ATCC_43183、瘤胃乳杆菌、毛螺菌属。6.Spearman相关性分析发现,气阴两虚兼痰湿证评分与单胞菌目和巨单胞菌属的丰度呈正相关(P<0.05);气阴两虚兼痰湿证评分与乳球菌属、Ruminococcaceae_UCG-014、普雷沃氏菌属_2、Bacteroides_stercoris_ATCC_43183、Lactococcus_garvieae_sub sp_garvieae的丰度呈负相关(P<0.05)。7.功能预测分析可见,两组主要在碳水化合物代谢、氨基酸代谢、辅因子和维生素的代谢等新陈代谢通路的差异较显著(P<0.05)。结论:1.肥胖2型糖尿病气阴两虚兼痰湿证患者与健康人群相比,菌群多样性均存在不同程度的降低,在菌群的均匀度、丰富度和群落构成上也存在一定差异。2.巨单胞菌属、脆弱拟杆菌、Bacteroides_stercoris_ATCC_43183、瘤胃乳杆菌、毛螺菌属可作为肥胖2型糖尿病气阴两虚兼痰湿证关键的生物标志物。3.肥胖2型糖尿病气阴两虚兼痰湿证患者与健康人群的肠道菌群存在功能代谢通路上的差异,其中新陈代谢通路的差异最为显著。
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