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目的：分别建立稳定表达抑癌基因PTEN和表皮生长因子受体(EGFR)的恶性胶质瘤细胞系，验证外源性PTEN、EGFR和EGFRvⅢ基因对U87MG细胞的影响。
方法：采用PCR方法，以人恶性胶质瘤细胞LN229 cDNA为模板，扩增PTEN基因编码区序列，将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(-)中，构建重组表达载体pcDNA3.1(-)/PTEN。分别将表达载体pcDNA3.1(-)/PTEN和pLWERNL(含野生型EGFR基因，由Dr.Frank Fumari惠赠)转染U87MG细胞，G418筛选后挑取抗性细胞克隆。应用RT-PCR和Western blotting法检测PTEN、EGFR在不同G418抗性细胞克隆的表达。MTT法检测外源性PTEN、EGFR和EGFRvⅢ基因对细胞增殖的影响。
结果：构建了真核表达载体pcDNA3.1(-)/PTEN，建立了稳定表达细胞系U87MG-PTEN和U87MG-EGFR，并经RT-PCR及western blotting验证。MTT显示，在无血清条件下培养六天，U87MG-PTEN细胞的增殖显著地低于U87MG细胞(P<0.05)，U87MG-EGFRvlII细胞(已建系)的增殖显著地高于U87MG细胞(P<0.05)，而U87MG-EGFR与U87MG细胞没有明显差别(P>0.05)。
结论：成功建立稳定表达抑癌基因PTEN、原癌基因EGFR及EGFRvⅢ的人恶性胶质瘤细胞系。为进一步研究所转染基因对相关下游细胞信号转导通路的影响及对恶性胶质瘤发生发展的作用打下良好基础。