CD95基因对胰腺癌细胞生物学特性及化疗耐药性的实验研究

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为了解CD95系统在胰腺癌细胞对化疗敏感性中的作用,该研究通过将CD95基因转入胰腺癌细胞株SW1990,使其过表达CD95,探讨其体外生物学特性与化疗敏感性的变化,并阐述CD95系统在胰腺癌中的作用,为体内动物实验奠定基础,并评价通过改变CD95系统提高化疗药的有效性及为胰腺癌的CD95核酸免疫联合治疗提供有意义的依据.该研究采用pBlusecript-CD95 cDNA质粒通过脂质体(lipofectamine)介导转入胰腺癌细胞株SW1990,以G418筛选抗性克隆,并随机挑选克隆大量扩增.以Northern blot和Western blot分别检测转染细胞中CD95 mRNA和蛋白的表达;观察转染细胞的生长曲线及克隆形成率;MTT法观察转染细胞对化疗药5-氟尿嘧啶(5-FU)、阿霉素(ADM)、双氟脱氧胞苷(GMB)及与抗CD95单克隆抗体联合治疗的反应;流式细胞仪(FCM)检测化疗药诱导转染细胞凋邙的作用.pBK-Neo-CMV空载体质粒作为空白对照.
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