PNS湿热证抗炎因子水平及黄葵胶囊的干预影响研究

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目的本研究依据肾病综合征湿热证与感染关系密切以及前人对湿热证的研究基础,选择原发性肾病综合征湿热证为对象,从分子生物学水平探讨观察原发性肾病综合征湿热证与血清抗炎因子IL-4、IL-10、IL-13的相关性,对促进和揭示原发性肾病综合征湿热证的实质、湿热病因部分病理机制及清热利湿中药的作用机制研究具有一定理论意义与应用价值。方法本课题主要采用前瞻性、随机对照的临床研究方法,应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA法)和荧光定量PCR的实验检测方法,通过对原发性肾病综合征湿热证、非湿热证患者体内主要抗炎因子IL-4、IL-10、IL-13的水平检测,利用SPSS软件进行统计处理,系统分析肾病综合征湿热证与抗炎细胞因子IL-4、IL-10、IL-13水平的关系。再通过对原发性肾病综合征湿热证患者经清热利湿药物黄葵胶囊治疗四周后,观察湿热证与抗炎细胞因子水平的变化情况,及清热利湿药物黄葵胶囊治疗PNS湿热证的临床疗效,利用SPSS软件进行统计处理,综合分析湿热证与抗炎症因子的相关性,并进一步分析具有清热利湿功效的黄葵胶囊治疗原发性肾病综合征湿热证的作用及机理。结果(一)PNS湿热证抗炎因子水平的实验研究按纳入标准选取肾综湿热证患者40例,非湿热证患者20例,共60例。经统计学检验,两组在性别、年龄、病理资料方面无显著性差异(P>0.05),具有可比性。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA法)检测抗炎因子IL-4、IL-10、IL-13的水平,荧光定量PCR法检测外周血单个核细胞中IL-13mRNA表达。结果如下:湿热证组患者体内的IL-4含量为45.67±8.27 pg/ml,高于非湿热证组患者体内的IL-4的含量32.73±9.01 pg/ml,经统计学检验有显著性差异(P<0.01)。湿热证组患者体内IL-10含量为29.97±4.22 pg/ml,高于非湿热证组患者体内IL-10的含量19.45±4.71 pg/ml,经统计学检验有显著性差异(P<0.01)。湿热证组患者体内IL-13含为25.92±6.94 pg/ml,高于非湿热证组患者体内IL-13的含量14.19±7.36 pg/ml,经统计学检验有显著性差异(P<0.01)。湿热证组患者的外周血单个核细胞中IL-13mRNA水平为0.65±0.11,明显高于非湿热证组IL-13mRNA水平0.35±0.09,经统计学检验有显著性差异(P<0.05)。与湿热证IL-13水平升高表现相同。湿热证组各患者的湿热证积分分别与IL-4、IL-10、IL-13含量相关性分析呈线性正相关(P<0.01)。(二)黄葵胶囊干预对PNS湿热证临床及抗炎因子水平影响的研究1、对症候的影响用药前治疗组和对照组中医症状积分比较无显著性差异(P>0.05),具有可比性。治疗组疗后对水肿、咽喉肿痛、胸腹痞闷、口干不思饮、口苦、口中粘腻、小溲黄赤、大便粘滞症状有明显改善(P<0.05或P<0.01)。对照组疗后对水肿、口干不思饮、口苦、小溲黄赤、大便粘滞症状显著改善(P<0.01)。治疗后两组中医症状积分组间比较,治疗组对水肿、皮肤疖肿、疮疡、咽喉肿痛、胸腹痞闷、口苦、口中粘腻、小溲黄赤、大便粘滞的改善作用有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。表明在改善中医症状方面,治疗组优于对照组。2、对实验室指标的影响湿热证经治疗后,治疗组和对照组患者比较,治疗组的活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、总胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白及24h尿蛋白定量指标的改善优于对照组(P<0.05或P<0.01)。3、对白细胞总数和超敏C反应蛋白的影响湿热证经治疗后,治疗组和对照组患者血中白细胞总数和超敏C反应蛋白均有所下降,经统计学分析,与疗前比较仅治疗组的差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01);治疗后两组组间比较,治疗组的白细胞总数、超敏C反应蛋白均值的降低更显著(P<0.05或P<0.01)。4、对抗炎因子水平的干预影响治疗组疗后IL-4水平明显下降(30.02±8.22pg/ml),与治疗前水平(45.63±8.30pg/ml)相比,有显著性差异(P<0.01)。对照组疗前后比较无显著性差异(P>0.05)。治疗后两组组间比较,治疗组IL-4含量的下降水平明显高于对照组(P<0.01)。治疗组疗后患者体内IL-10水平降低(19.21±4.78pg/ml),与治疗前水平(30.01±4.19pg/ml)相比,有显著性差异(P<0.01)。对照组疗前后比较无显著性差异(P>0.05)。治疗后两组组间比较,治疗组IL-10降低水平明显高于对照组(P<0.01)。治疗组疗后IL-13水平显著下降(14.11±7.20pg/ml),与治疗前的水平(25.94±6.91pg/ml)相比,有显著性差异(P<0.01)。对照组疗前后比较无显著性差异(P>0.05)。治疗后两组组间比较,治疗组IL-13下降水平明显高于对照组(P<0.01)。经药物治疗后,湿热证治疗组患者外周血单个核细胞中IL-13mRNA表达水平为0.34±0.06,明显低于对照组IL-13mRNA表达水平0.60±0.09,经统计学处理后,有统计学意义(P<0.05)。治疗组患者治疗前后中医症状总积分差值分别与IL-4、IL-10、IL-13水平含量差值相关性分析呈线性正相关(P<0.05)。结论1、由PNS湿热证抗炎因子水平及黄葵胶囊干预对PNS湿热证抗炎因子水平影响的研究,结果显示原发性肾病综合征湿热证患者抗炎因子IL-4、IL-10、IL-13水平异常增高;原发性肾病综合征湿热证与抗炎因子水平的增高具有一定的相关性,湿热证症候积分分别与IL-4、IL-10、IL-13水平呈线性正相关。2、由黄葵胶囊对PNS湿热证临床的干预影响结果显示:清热利湿黄葵胶囊具有下调原发性肾病综合征湿热证患者体内异常增高的抗炎因子水平的作用。3、清热利湿药物黄葵胶囊能较好的缓解患者的湿热症状,改善肾综湿热证患者蛋白尿、高脂血症及高凝状态等,可提高肾综湿热证的临床疗效,减轻肾综病情,其作用机理可能与该药的抗炎、清除抗原等作用有关。
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