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[研究目的]半乳糖凝集素3(Galectin-3, Gal-3)是一种β-半乳糖结合蛋白,能特异性与细胞表面糖蛋白或糖脂的糖结合域结合。它广泛在上皮细胞和免疫细胞中表达,参与了细胞生长、黏附、增殖、分化等多种过程,并可能参与肿瘤的发生、发展和血管生成。研究已发现Gal-3在多种恶性肿瘤如脑胶质瘤、肺癌、乳腺癌中表达上调,但其在食管癌中的表达及作用研究甚少。我们前期研究已证实Gal-3在食管癌中有表达,在此基础上,本研究旨在探明沉默Gal-3表达对食管癌Eca109细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭等多种生物学行为的影响。[研究方法]1.应用小干扰RNA (Small interfering RNA, siRNA)转染食管癌Eca109细胞,通过显微镜观察转染后的荧光效果,评估转染效率；2.通过蛋白质印迹(western blot)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两种siRNA对Eca109细胞Gal-3的表达干扰情况,筛选出对Gal-3表达抑制较强的siRNA,完成后续的功能实验;3.采用CCK-8实验,检测siGal-3组、阴性对照组和空白对照组Eca109细胞在siRNA转染后24h、48h、72h和96h的增殖能力；4.采用流式细胞术,检测Annexin V/7-AAD标记的Eca109细胞,探究Gal-3对细胞凋亡能力的影响；5.通过计数穿过Transwell小室人工基质膜的细胞数目,比较三组细胞的迁移和侵袭能力,评估Gal-3对细胞迁移和侵袭的影响。[实验结果]1.应用FAM-siRNA转染Eca109细胞,于显微镜下可观察到广泛分布的弱小荧光,并且荧光位置与细胞位置对应,转染效率在85%以上,表明siRNA已转入Eca109细胞,并具有较好的转染效果；2. siGal-3组细胞Gal-3的mRNA和蛋白水平受到明显抑制,显著低于阴性对照组和空白对照组细胞(P<0.05)；3.在siRNA转染Eca109细胞后72h和96h,siGal3组细胞相比两组对照组细胞增殖能力明显降低(P<0.05),而在24h和48h三组细胞的增殖能力无明显差别(P>0.05);4.与对照组细胞相比,Gal-3表达下调会显著增加细胞的凋亡率(P<0.05),暗示着Gal-3的表达对细胞的凋亡起着抑制作用；5. si Gal-3组细胞的迁移和侵袭能力明显低于对照组细胞(P<0.05),表明Gal-3的表达与细胞的迁移和侵袭有关,沉默Gal-3的表达有助于降低细胞的迁移和侵袭能力。[结论]Gal-3在恶性肿瘤进展过程中发挥着重要作用,干扰Gal-3表达能明显抑制食管癌Eca109细胞的增殖、迁移、侵袭能力,显著增加细胞的凋亡,因而深入探究Gal-3在食管癌发生发展中的作用机制可能会为食管癌的治疗提供新的靶点。