丙溴磷（Profenofos）和水胺硫磷（Isocarbophos）是典型的有机磷农药,主要用于防治蚜虫、红蜘蛛等害虫对于棉花、水稻、蔬菜等作物的危害。随着丙溴磷和水胺硫磷的大量使用,不仅加剧生态环境污染,同时还严重威胁人体健康。微生物修复因其降解效率高、无二次污染、成本低等优点,成为人们研究有机磷农药降解的热门方向。本论文以前期分离的一株Cupriavidus nantongensis X1T为研究对象,开展了菌株X1T对丙溴磷和水胺硫磷的降解特性研究,通过克隆有机磷水解酶基因（opd B）,构建重组有机磷水解酶基因工程菌E.coli BL21-opd B,开展了工程菌对丙溴磷和水胺硫磷的降解特性研究,对工程菌E.coli BL21-opd B的表达条件进行优化。主要研究结果如下:1、在无机盐培养基中,菌株X1T对丙溴磷降解的最佳接菌量为8.8×10-7 cells/m L,最适降解温度为37℃;以去离子水为对照,在5 mmol/L不同金属离子溶液中,对菌株X1T降解丙溴磷有促进作用的是Ca2+、Co2+、Ni2+、Mn2+、Mg2+,其中Ni2+促进效果最好。在无机盐培养基中,菌株X1T对水胺硫磷降解的最佳接菌量为8.8×10-7cells/m L,最适降解温度为37℃;以去离子水为对照,在5 mmol/L不同金属离子溶液中,Fe3+、Cr3+抑制了菌株X1T对水胺硫磷的降解,有促进作用的是Na+、K+、Ca2+、Co2+、Ni2+、Mn2+、Mg2+,其中Ca2+促进效果最好。2、通过RT-q PCR测定了在丙溴磷降解过程中,有机磷水解酶基因opd B上调表达,从降解菌株X1T基因组中克隆了有机磷水解酶基因opd B,基因全长1575 bp,构建p ET29a-opd B表达载体并转化至E.coil BL21（DE3）,获得了含有机磷水解酶Opd B的工程菌E.coli BL21-opd B。3、利用大肠杆菌原核表达方式表达了opd B基因,分别对诱导温度、诱导时间、IPTG终浓度进行优化,得出最佳诱导条件为:0.5 m M IPTG,25℃诱导8 h。获得有机磷水解酶Opd B的可溶性融合蛋白,体外降解实验显示,粗酶具有降解活性,对丙溴磷的降解速率常数为0.0388 h-1,半衰期为17.86 h,代谢产物为2-氯-4-溴苯酚。4、在无机盐培养基中,工程菌E.coli BL21-opd B对丙溴磷降解的最佳接菌量为2.1×10-6 cells/m L,最适降解温度为37℃;工程菌E.coli BL21-opd B对水胺硫磷降解的最佳接菌量为8.4×10-7 cells/m L,最适降解温度为37℃。