外源—氧化氮对毛木耳子实体性状、胞外酶活性及培养料细菌多样性的影响

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本试验研究添加外源一氧化氮(Nitric Oxide,NO)供体硝普钠(Sodium Nitroprusside,SNP)对毛木耳子实体性状、木质素过氧化物酶(LiP)、漆酶、锰过氧化物酶(MnP)、纤维素酶(LC)的活性和培养料细菌多样性的影响。利用Illumina MiSeq高通量测序技术对毛木耳菌丝满袋、原基分化、耳片扩长和子实体成熟时期的培养料的细菌群落结构进行了统计分析,研究NO对于培养料细菌群落结构的影响,为NO在食用菌栽培中的应用提供理论依据。取得的主要结果如下:(1)子实体性状:当SNP浓度为0.25 mmol/L~0.75 mmol/L能显著增加耳片厚度,其中SNP浓度为0.75 mmol/L达最大值(1.58 mm);当SNP浓度为0.75 mmol/L能显著增加平均耳片面积;当SNP浓度为0.25 mmol/L~0.50 mmol/L能显著增加耳片单重,其中SNP浓度为0.50 mmol/L达最大值(235.91 g);当SNP浓度为0.25mmol/L~0.50 mmol/L能显著增加耳片簇重,其中SNP浓度为0.25 mmol/L达最大值(365 g);当SNP浓度为0~0.75 mmol/L时毛木耳每簇耳片数没有显著差异,但SNP浓度为1.00 mmol/L时毛木耳每簇耳片数皆显著低于对照组,说明高浓度的SNP可能会影响毛木耳的开片;其中当SNP浓度为0.50 mmol/L子实体性状综合结果最优。(2)酶活性:在各个生长时期中SNP浓度为0.25 mmol/L~1.00 mmol/L时皆可显著提高锰过氧化物酶和木质素过氧化物酶活性,且SNP浓度为0.75 mmol/L时,锰过氧化物酶活性最高,SNP浓度为0.50 mmol/L时,木质素过氧化物酶活性达最高;在菌丝满袋、原基分化、耳片扩长时期SNP为0.50 mmol/L~1.00 mmol/L时可以显著提高毛木耳菌丝漆酶活性,其中SNP浓度为0.75 mmol/L的漆酶活性皆达到最高;在各个生长时期SNP浓度为0.25 mmol/L皆会显著提高纤维素酶活性,且该浓度在各个时期纤维素酶活性都为最大值;在原基分化、耳片扩长期SNP浓度为0.50 mmol/L和0.75 mmol/L可以显著提高毛木耳纤维素酶活,且该时期中SNP为1.00 mmol/L时会抑制纤维素酶活性;在子实体成熟期施加SNP的各处理纤维素酶活性皆高于对照,且在SNP浓度为1.00 mmol/L时纤维素酶活性最高。子实体性状与胞外酶活的相关性分析结果表明:锰过氧化物酶、木质素过氧化物酶、漆酶和纤维素酶都与子实体性状有关联。(3)细菌多样性:毛木耳培养料以厚壁菌门丰度最高。厚壁菌门在毛木耳在各生长时期变化不明显,而当SNP浓度为0.50 mmol/L时原基分化期厚壁菌门丰度明显低于其他处理。其它优势细菌门包括拟杆菌门、放线菌门和蓝藻门等。另外,毛木耳培养料中优势细菌属为Bacillus。细菌功能预测共鉴定出毛木耳培养料细菌KEGG通路39条,主要涉及代谢、环境信息处理和遗传信息处理。在毛木耳生长过程中,膜转运是其最主要的生物途径,该生物途径随着毛木耳的生长,相对丰度呈先增后减,并且在同一生长时期SNP浓度为0.75 mmol/L的相对丰度最高。综上所述,适量添加一氧化氮能显著促进毛木耳子实体的生长,参与培养料物质分解与转化的几种酶的活性及优势细菌的丰度。生产实践中,建议使用浓度控制在0.25 mmol/L-0.50 mmol/L。
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