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研究现状：变应性鼻炎(Allergic rhinitis，AR)是由抗原特异性IgE介导的，以介质释放为开端的多种免疫细胞和细胞因子参与的鼻粘膜的慢性变应性炎症反应，近几十年来发病率呈增加趋势，严重影响人们生活质量，诱发支气管哮喘、鼻窦炎和鼻息肉等疾病，已成为一个亟待解决的全球性健康问题。 AR是IgE介导的Ⅰ型变态反应，神经及递质均参与发病过程，免疫细胞及细胞因子(Cytokine，CK)是发病的中心环节，集中表现为Th2类优势反应亢进。2000年，Yssel等使用原位杂交(In situ hybridization，ISH)方法证实支气管哮喘患者气管粘膜中IL-4 mRNA、IL-5mRNA、GM-CSF mRNA等基因表达水平明显升高。基础研究表明IL-4生物学作用广泛：刺激B细胞分化成熟、分泌IgE抗体；促使IgM向IgE转换；诱导Th0细胞分化为Th2类细胞，分泌Th2类细胞因子IL-4、IL-5、IL-13等，增强Th2类优势免疫反应；趋化嗜酸性粒细胞(Eosinophil，EOS)，上调血管内皮细胞粘附分子-1(Vascular cell adhesion molecule-1，VCAM-1)的表达，募集炎症细胞，促发和加重AR病理反应。IL-5可调节EOS等免疫细胞的增殖、分化、活化、释放细胞毒物质，维持和延续AR的慢性炎症反应；刺激血管内皮细胞表达VACM-1，增加EOS的粘附性。GM-CSF与IL-5有协同作用，主要作用于EOS，促其分化成熟，进入外周血中，在AR患者鼻粘膜中可趋化、活化EOS；参与AR炎性反应。因而IL-4、IL-5和GM-CSF等主导着AR的病理发展过程。2002年，Hussain等使用核酸疫苗抑制IL-4 mRNA郑州大学2003届硕士研究生毕业论文雷公藤甲素对变应性鼻炎豚鼠模型基因转录的影响及机制研究、工L一5 mRNA和GM一CSF mRNA等的表达，可明显减轻支气管哮喘鼠体内ThZ类优势反应，，减少EOS的浸润，控制症状。 CK等炎性因子的基因表达与核转录因子的活性高低密切相关。核转录因子一kappaB(Nuelear transeripts faetor kappaB，NF KB)是其中一种，它可以通过与核内NF一KB反应性基因结合，调节CK的表达水平，是调节炎性反应的关键核因子，1998年，Hart等发现在支气管哮喘患者气管粘膜细胞中有大量的NF一KB激活，提示NF一KB参与了变应性疾病的发生。 目前，AR的治疗药物众多，类固醇类药物疗效确切可靠，但严重副作用限制其广泛使用。寻找理想的替代药物重要而迫切。雷公藤类药物具有广泛的免疫抑制作用和激素样作用，无激素样副作用，已成功应用于支气管哮喘的临床治疗，后者在解剖、组织生理、免疫病理及治疗等方面与AR存在广泛的相似性。雷公藤类药物对AR的治疗作用研究迄今未见报道。目的:本实验拟通过AR豚鼠模型探讨雷公藤甲素(T riPt。lide，TP)对AR病理发展过程中的关键致病因子工L一4、IL一5及GMweCSF基因表达的影响及机制，为TP试用于AR临床治疗提供实验依据。方法:动物分组:80只健康豚鼠随机分为四组:卵清蛋白(ovalbumin，OV)致敏组，TP处理组，地塞米松(Dexamethasone，DM)处理组和生理盐水(0 .9%Sodium ehioride，se)组。建模:参照Konno方法并改良:基础致敏:ov 0.3mg，Al(0H)。30mg，加生理盐水至lml，腹腔注射，隔日一次，共7次;强化致敏:0.25%0V/生理盐水液Zml，雾化吸入，连续5天，间隔一周;激发:1% OV 20一50pl双侧鼻腔滴入，观察豚鼠症状，2h后再观察1次。根据吉林大学医学院报道建模评分标准判定模型是否成功。TP处理组:使用TP o.smg/kg分六次于强化致敏和激发前30min腹腔注射和鼻腔滴入;DM处理组:给予DM 10mg/kg，方法同TP;SC组:使用SC代替0V。其它处理均同0V组;取材:模型成功后48h，0.3%戊巴比妥钠lml/kg腹腔注射麻醉，取出鼻粘膜;取外周1m，肝素抗凝，用密度梯度离心法分离出外周血单个核细胞(Per一pheral bl。od’mononuClearcell，PBMC)，处理后制片待检。 NFee KB活性检测标本制备:取豚鼠PBMC分为四组，在RPMll64O培养液中重悬培养，佛波脂(Phorbol myristate aeetate，PMA)刺激组:加PMA至50ng/ml;郑州大学2003届硕士研究生毕业论文雷公藤甲素对变应性鼻炎豚鼠模型基因转录的影响及机制研究除PMA外，TP处理组:另加TP至10一5 mol/L;DM处理组:另加DM至10一smol/L;正常组。37℃，5% COZ条件下96孔培养板中培养Zh，分别收集，涂片，固定。 CKml水A和NP-- KB的检测操作依试剂说明进行，分设阴性对照。阳性结果判定:胞质和少量胞核内出现黄色和棕黄色颗粒者为阳性，均质黄染者为阴性。统计分析:任取5个高倍镜(X 40)视野计数阳性细胞数，结果用x士s表示，使用SPSS10.O统计软件行单因素方差分析，独立样本t检验，p<0 .05为差异显著。结果:动物行为:0v致敏组模型动物烦燥不安，鼻痒、喷嚏、流涕症状明显，DM处理组和TP处理组少量模型动物有轻微症状，神态安静。SC组偶有症状。 HE染色:0V致敏组:可见鼻粘膜组织增厚、疏松、腺体和小血管腔扩张，大量炎性细胞片状浸润，DM处理组和TP处理组中，上述改变明显减轻，少量炎性细胞散在浸润，SC组鼻粘膜未见异常改变。 PBMC:Giemsa染色，可见大量PBMC胞核染成蓝和深蓝色均匀散布。