【摘 要】
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目的:通过RNA干扰技术探讨沉默核因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)对缺氧SGC-7901胃癌细胞增殖及侵袭的影响及其机制。方法:将NF-κB沉默质粒pcDNA6.2-GW/EmGFPmiR对SGC-7901
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目的:通过RNA干扰技术探讨沉默核因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)对缺氧SGC-7901胃癌细胞增殖及侵袭的影响及其机制。方法:将NF-κB沉默质粒pcDNA6.2-GW/EmGFPmiR对SGC-7901细胞进行转染,并筛选稳定转染细胞株。设置对照组、缺氧组、干扰组、联合组(缺氧+干扰)。通过细胞倍增时间、平板克隆形成实验、裸鼠移植瘤的体积和重量变化及生长曲线观察不同处理后各组细胞及移植瘤增殖的变化。台盼蓝排斥法检测细胞存活率。侵袭实验检测细胞侵袭能力。免疫组织化学、Western blot定量检测各组NF-κB、缺氧诱导因子-1α(Hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)和磷脂酶D-1(Phospholipase D-1,PLD-1)蛋白变化。结果:增殖能力:较之对照组,缺氧组增强,干扰组及联合组减弱(P<0.05);细胞存活率:较之对照组,缺氧组存活率变化不显著,干扰组及联合组存活率降低(P<0.05);侵袭能力:较之对照组,缺氧组增强,干扰组及联合组减弱(P<0.05);蛋白定位:缺氧组NF-κB胞核胞浆均有表达,以胞核为主;蛋白质表达:较之对照组,NF-κB、HIF-1α和PLD-1在干扰组表达降低,缺氧组表达增多(P<0.05);较之缺氧组,联合组表达降低(P<0.05)。结论:缺氧下HIF-1α和NF-κB可能存在相互关系,并互相影响,抑制NF-κB可降低HIF-1α及PLD-1表达,从而减弱缺氧胃癌细胞增殖和侵袭能力。
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