TGF-β诱导人肺腺癌细胞A549中血管生成相关基因ANGPTL4的表达上调部分依赖乏氧诱导因子HIF-1

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【目的】通过RNA干扰技术沉默人肺腺癌细胞A549中乏氧诱导因子-1 ( HIF-1α)的表达,初步探讨HIF-1在TGF-β介导的ANGPTL4表达上调过程中的作用。【方法】扩增并纯化HIF-1α-shRNA及空白质粒,分别转染至人肺腺癌细胞株A549将转染了HIF-1α-shRNA质粒的A549细胞株(转染实验组)、空白质粒转染的A549细胞株(阴性对照组)以及未转染的A549细胞株(空白对照组)分别给予相同浓度的TGF-β1进行干预,使用RT-PCR半定量检测各组细胞内的HIF-1α与ANGPTL4的mRNA表达水平,使用Western-blot检测各组细胞内的HIF-1α与ANGPTL4蛋白的表达水平。【结果】经过TGF-β1处理0h,12h,24h,48h四个时间点后后,三组中HIF-1α和ANGPTL4的mRNA及蛋白表达水平存在显著性差异(P<0.05),组间比较:阴性对照组和实验组中两者的mRNA及蛋白表达水平差异具有显著性(P<0.05),而空白组与阴性对照组则未见显著性差异(P>0.05)。三组组内比较,各组内部HIF-1α和ANGPTL4的mRNA及蛋白表达水平与TGF-β1的作用时间均具有时-效相关性(P<0.05)。【结论】HIF-1可能是ANGPTL4的上游调控基因,并且参与TGF-β-Smad信号通路从而介导ANGPTL4的表达上调。
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