论文部分内容阅读
胚挽救技术是无核葡萄抗性改良的重要手段之一。利用葡萄试管苗微嫁接技术将无核葡萄胚挽救后代嫁接到耐寒砧木上,对其抗寒性改良与组织再生具有重要的参考价值。本试验以14种葡萄微嫁接砧木为试材,测定其种子萌发性状及实生苗在4℃、0℃、-4℃和-10℃低温胁迫下抗寒指标的变化,利用灰色关联分析法、隶属函数法和聚类分层法筛选葡萄微嫁接适宜的砧木;以鲜食葡萄品种‘晶红宝’为试材,研究组培过程中外植体的消毒、组培污染防治、培养基营养添加物质、光周期、微嫁接方法和绑缚材料等因素对微嫁接苗成活情况的影响,采用响应面法确定葡萄微嫁接苗组培的最佳试验条件,并通过切片观察葡萄微嫁接砧穗愈合的组织形态学变化;以‘晶红宝’自交胚挽救苗做接穗,探究微嫁接技术在无核葡萄胚挽救后代抗寒性的提高和畸形苗转化上的应用,以期进一步提高葡萄育种效率,为无核葡萄育种研究提供良好的材料基础和理论依据。主要研究结果如下:1.14种葡萄砧木中,双丰、140R、山河4号和绛县5号的种子萌发率和实生苗成活率显著优于其他种葡萄;实生苗抗寒性强弱顺序为:绛县4号>绛县5号>绛县7号>5BB>左优红>140R>双丰>绛县复叶葡萄>山河1号>山河4号>北醇>SO4>双优>绛县10号。2.经0.1%氯化汞消毒8 min的葡萄茎段组培污染率显著低于6 min和10 min处理;MS培养基(pH 5.8~6.0)添加香蕉泥可显著降低微嫁接苗的褐变率和污染率,促进不定根的伸长,其中添加500 mg/L香蕉泥培养的微嫁接苗成活率最高;劈接法建立的微嫁接苗成活率显著高于“L”形接法和圆孔法;锡箔纸作绑缚材料的微嫁接苗成活率显著高于嫁接夹、Parafilm膜、吸管和铝片;16/8 h(光/暗)的组培光照环境可显著提高微嫁接苗成活率;橙皮素对葡萄组培污染菌种的生长有显著抑制作用,可降低葡萄组培苗的污染率。3.葡萄微嫁接砧穗接口部位在3 d时出现愈伤组织,7 d愈伤组织进一步扩大到接口外部,10 d时观察到形成层细胞的出现。4.无核葡萄品种‘晶红宝’自交胚挽救效率平均为16.0%,利用微嫁接将胚挽救幼苗嫁接到抗寒砧木上,微嫁接苗的抗寒性显著优于胚萌发苗;而将胚萌发形成的有根无叶畸形苗做微嫁接,目前尚未获得成活的微嫁接苗。