稳心草黄酮类化合物对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖及碱性成纤维细胞生长因子影响的研究

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目的:研究稳心草黄酮类化合物对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和细胞表达碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平的影响,初步探讨其防治肺动脉高压的疗效及作用机制,为中药开发提供基础研究资料。 方法:1.稳心草品种由药学专家进行植物基源鉴定,稳心草黄酮类化合物委托甘肃中医学院科研中心提取并鉴定。2.组织贴块法培养大鼠肺动脉平滑肌细胞,实验用3~8代生长良好的传代细胞。倒置显微镜观察细胞生长状态,电镜鉴定(超微结构分析)。3.MTT比色法测定细胞增殖;流式细胞仪测定各组细胞细胞周期;双抗体夹心ABC-ELISA法检测各组细胞培养液中bFGF水平。 结果:1.贴块培养的细胞经电镜鉴定为动脉平滑肌细胞:倒置相差显微镜观察,证明细胞生长状态良好。2.稳心草黄酮类化合物对体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞群有上调细胞周期中G0/G1期细胞数目,下调G2/M期、S期细胞数目的作用。3.黄酮类化合物高、中剂量组细胞计数、细胞周期、细胞培养液中bFGF含量与空白对照组比较有统计学意义(P<0.05);黄酮类化合物高、中、低剂量组比较有统计学意义(P<0.05);黄酮低剂量组与空白对照组比较无统计学意义(P>0.05)。 结论:1.稳心草黄酮类化合物可抑制体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖,机制可能是与其能够延缓细胞周期进程,导致G0/G1期细胞数量增多,G2/M期和S期细胞数量减少(P<0.05)有关。2.稳心草黄酮类化合物可降低细胞分泌bFGF的水平,且降低程度与药物剂量呈一定的正相关。
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