雷公藤是一种具有很高的经济价值的珍贵植物,然而与其他很多药用植物相同的是,自毒问题也同样存在于雷公藤的种植过程中。许多种类的内生真菌存在于药用植物体内,并且宿主植物的生长,抗逆性及次生代谢活动会受到这些内生真菌的明显作用。NS-5是本研究的初始对象,是从健康雷公藤植株体内筛选得到的内生真菌,通过真菌-宿主共生体系构建。在此基础上,采用组织培养及细胞悬浮培养等方法,结合真菌-宿主细胞悬浮共培养及真菌诱导子添加技术,研究了这些内生真菌对宿主自毒物质产生,种类及释放途径的影响,分析了其在宿主自毒应答中的作用及调控效应,主要结果如下:1、将雷公藤组培苗与前期从健康雷公藤植株体内分离得到内生真菌NS-5构建共生体系,并且对雷公藤的生长情况、叶绿素含量、元素吸收等特征的影响情况进行评价,八种器官水浸液均能不同程度地抑制雷公藤重量的增加,对雷公藤茎的伸长和叶片的增多均具有抑制作用。抑制效果:无菌根系分泌物>无菌叶浸提液>无菌根浸提液>无菌茎浸提液;共生根系分泌物>共生叶浸提液>共生根浸提液>共生茎浸提液;共生根系分泌物>无菌根系分泌物;共生叶浸提液>无菌叶浸提液;共生根浸提液>无菌根浸提液;共生茎浸提液>无菌茎浸提液。2、研究内生真菌NS-5对受体雷公藤种子自毒作用的影响。比较经过八种样液处理的雷公藤种子的发芽率、发芽速率、可溶性蛋白、可溶性糖以及酶活性等各项指标,相比空白对照,各组织水浸液及根系分泌物样液处理的雷公藤种子的萌发率和萌发速率、酶活性都有所降低,而萌发种子内的各种有机物质却远高于空白对照,这说明各种处理均会对雷公藤种子的萌发产生强烈的自毒作用。用GC/MS的方法分析对比各样液的成分,得出NS-5主要通过影响自毒物质的含量,从而对宿主雷公藤的自毒作用产生影响。3、雷公藤内生真菌NS-5的诱导子能够加强受体雷公藤组培苗的自毒作用,可能是雷公藤内生真菌NS-5的诱导子能够促进雷公藤悬浮细胞释放自毒物质,并且菌液诱导子促进雷公藤悬浮细胞释放自毒物质的能力大于菌体诱导子促进雷公藤悬浮细胞释放自毒物质的能力。随着时间的推移,雷公藤悬浮细胞释放出的自毒物质会在培养液中累积,也就使得9d的样液中含有较高浓度的自毒物质,所以9d处理的雷公藤组培苗长势<6d处理的雷公藤组培苗长势<3d处理的雷公藤组培苗长势。即:对比相同时间不同诱导子的抑制效果时,有CK-3d