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目的：1.观察HBeAg阳性慢性乙型肝炎(Chronic Hepatitis B, CHB)患者调节性T细胞(regulatory T cell)和Th17细胞(T helper cell17, Th17cell)及其细胞因子的免疫平衡状态,分析其与肝功能、HBV-DNA水平、HBsAg及HBeAg水平的相关性,探讨Treg/Th17细胞及其细胞因子在HBeAg阳性CHB发病中的作用,为抗病毒治疗时机提供参考。2.观察替比夫定治疗HBeAg阳性CHB患者期间Treg/Th17细胞及其细胞因子的变化规律,探讨替比夫定抗病毒治疗对细胞免疫功能的影响,分析其变化与治疗期间HBeAg转阴及HBeAg水平变化的关系,探讨替比夫定的高HBeAg血清学转换是否与Treg/Th17平衡的变化有关,为替比夫定抗病毒治疗预测HBeAg血清学转换提供免疫学标志。方法：收集我院2012年9月至2013年9月门诊或住院HBeAg阳性CHB患者27例,接受替比夫定600mg/日抗病毒治疗,每4周随访1次,随访24周,期间采用流式细胞技术检测患者外周血Treg和Th17细胞频数,采用酶联免疫吸附法检测患者血清TGF-β1、IL-17细胞因子水平。同时采用全自动生化分析仪检测不同时间点谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase, ALT)等肝功能指标、应用实时定量PCR法检测HBV-DNA水平,应用电化学发光法检测HBsAg、HBeAg水平。以同期12例健康人作为对照组。比较健康对照组与HBeAg阳性CHB患者的Treg/Th17细胞及其细胞因子的免疫状态,分析Treg/Th17细胞及其细胞因子与肝损伤程度及病毒学的相关性。观察替比夫定治疗过程中Treg/Th17细胞及其细胞因子的变化规律,分析其与HBeAg水平变化的关系。结果：1.HBeAg阳性CHB患者基线时外周血Treg细胞频数[(5.54±1.66)%]、Th17细胞频数[(1.76±0.55)%]及Treg/Th17比率(3.35±±1.11)均明显高于健康对照组[分别为(3.16±±0.54)%、(1.31±±0.37)%、(2.59±0.86)],差异均有统计学意义(均P<0.05)。相应的HBeAg阳性CHB患者血清TGF-β1水平[(215.81±61.14)pg/mL]、IL-17水平[(3.17±40.21) pg/mL]、TGF-01/IL-17比率(3.13±±1.53)也明显高于健康对照组[分别为(92.14±36.47) pg/mL、(55.87±18.77)(1.61±0.22)],差异均有统计学意义(均P<0.05)。2.HBeAg阳性CHB患者基线时Treg细胞频数、TGF-β1水平、Treg/Th17比率及TGF-β1/IL-17比率均与HBV-DNA水平呈显著正相关(均P<0.05)。Th17细胞比率及IL-17水平均与ALT水平呈显著正相关(均P<0.05),而Treg/Th17比率及TGF-β1/IL-17比率均与ALT水平呈显著负相关(均P<0.05)。Treg细胞比率、TGF-β1水平及Treg/Th17比率均与HBsAg水平呈显著正相关(均P<0.05)。Treg细胞比率、TGF-β1水平及TGF-β1/IL-17比率均与HBeAg水平呈显著正相关(均P<0.05)。3.替比夫定治疗期间患者应答情况：治疗期间HBV-DNA水平、ALT水平、HBsAg及HBeAg水平均呈下降趋势。24周时患者HBV-DNA阴转率88.9%,所有患者ALT复常,HBsAg及HBeAg较基线显著下降[分别为2688(398.9-7846)vs.29815(3405-52000) IU/mL;778.5(24.6-1410) vs.19.1(0.32-437.6) COI,均P<0.05]。治疗24周时有6例患者发生HBeAg转阴,其中2例发生HBeAg血清学转换,出现HBeAb。4.替比夫定治疗过程中,HBeAg阳性CHB患者Treg细胞频数及TGF-β1水平呈下降趋势,Treg细胞频数在8周时开始与基线比较差异有统计学意义(P<0.05), TGF-β1水平4周时开始与基线比较差异有统计学意义(P<0.05)。Th17细胞频数及IL-17水平呈先升高后下降趋势,8周时达到最高点,明显高于基线,与基线比较差异均有统计学意义(P<0.05),12周至24周呈下降趋势,24周时稍高于基线水平,但差异无统计学意义(P>0.05)。 Treg/Th17比率及TGF-β1/IL-17比率均呈下降趋势,8周与基线比较差异有统计学意义(P<0.05),12周时达到最低水平,而后略有升高。5.替比夫定治疗24周时HBeAg转阴组基线时Treg细胞频数和Treg/Th17比率均明显低于HBeAg未转阴组[分别为(4.15±0.71) vs.(5.93±1.65)%;(2.67±1.17) vs.(3.64±0.94)],差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗期间Treg细胞频数、TGF-β1水平变化与HBeAg水平变化均呈正相关(分别r=0.470,r=0.573；均P<0.05)。结论：1.与健康人相比,HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者Treg/Th17及TGF-β1/IL-17比率失衡,Treg细胞和TGF-β1水平与HBV-DNA水平、HBsAg及HBeAg水平正相关,可能造成了慢性HBV感染的免疫耐受状态；Th17细胞和IL-17水平与ALT水平正相关,提示Thl7细胞及IL-17参与HBV感染的免疫损伤过程,可能有利于HBV的清除。监测慢性乙型肝炎患者Treg/Th17细胞及其相关细胞因子失衡状态,可能为抗病毒治疗时机选择提供参考。2.替比夫定抗病毒治疗不仅可以快速抑制病毒复制,而且可能对Treg/Th17平衡有调节作用。Treg细胞及TGF-β1水平的下降,可能有利于打破患者的免疫耐受状态,Th17细胞及IL-17水平的暂短升高,可能有利于早期病毒的清除。3.替比夫定治疗期间出现HBeAg转阴的慢性乙型肝炎患者,其基线时Treg细胞免疫抑制效应较HBeAg未转阴患者弱,提示基线时发挥免疫抑制效应的Treg细胞频数越低,出现HBeAg转阴的可能性越大,故Treg/Th17平衡状态可能影响HBeAg的转阴,且治疗期间Treg细胞频数和TGF-β1水平的下降与HBeAg水平的下降相关,故可通过监测治疗期间Treg细胞频数及其细胞因子的变化为预测替比夫定抗病毒治疗HBeAg的转阴提供免疫学标志。