疼痛是一种让人不愉快的感受,在许多疾病中都可能出现,往往让患者遭受精神和肉体上的双重痛苦,严重影响患者的工作和生活。目前临床上用到的镇痛药物都有较强的毒副作用,因此研发一种高效、副作用小、无成瘾性的新型镇痛药物很有必要。野木瓜是一种传统中药,常被用于抗炎和镇痛作用,其片剂、注射剂等制剂已被广泛应用于临床,有研究表明野木瓜镇痛的有效成分是总皂苷。大脑是神经系统最高级的部分,其通过神经元接受外界刺激以及传递信号,疼痛这一感觉的产生与大脑有密不可分的联系,目前野木瓜总皂苷在中枢神经系统中的作用尚不明晰,因此,研究野木瓜总皂苷在中枢神经系统中的作用机制对研究新型镇痛药物有重大意义。本文旨在研究野木瓜总皂苷在中枢神经系统中的具体影响以及作用机制,对野木瓜总皂苷镇痛作进一步探讨。我们选取体外培养成熟的小鼠大脑皮层神经元,用野木瓜总皂苷溶液孵育之后,运用膜片钳技术,记录神经元的mEPSC、mIPSC、eEPSC和eIPSC,发现野木瓜总皂苷可以增加自发抑制性突触反应,测定野木瓜总皂苷的时间依赖性和浓度依赖性后,选定10μg/ml野木瓜总皂苷溶液孵育60min为后期实验的实验条件。基于以上结果,我们选定抑制性突触的标记物谷氨酸脱羧酶65(GAD65)进行免疫荧光染色实验测定野木瓜总皂苷孵育后的大脑神经元抑制性突触的突起密度和面积,发现野木瓜总皂苷对抑制性突触的数量和大小没有影响。在高渗溶液的刺激下记录孵育后神经元的可释放囊泡库,发现野木瓜总皂苷对抑制性突触前的可释放囊泡量无影响。通过荧光定量RTPCR测定野木瓜总皂苷孵育后的大脑神经元抑制性突触后的GABAA受体数量的变化,发现野木瓜总皂苷对受体数量无影响。在GABA溶液的刺激下记录GABA电流,结果表明,野木瓜总皂苷使抑制性突触后膜上的GABA受体活性增强。后又探索对野木瓜总皂苷镇痛的有效时间,发现其镇痛作用至少可以持续8 h。通过这一系列实验我们得出结论,野木瓜总皂苷对大脑皮层神经元中的自发抑制性突触反应有显著增加作用,即主要是通过在静息状态下持续提高突触前膜囊泡释放频率和后膜上GABA受体活性以起到镇痛作用,并且这一作用至少可以持续8 h。结论进一步阐明了TSS在中枢神经系统中的作用机制,表明TSS可能是新型镇痛药的候选药。