【摘 要】
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研究背景静脉畸形（Venous Malformations,VMs）,常被称为海绵状血管瘤,作为一种最常见、发病率最高的低流速脉管畸形,可单独发病或者合并其他脉管类畸形同时发病,其病变发生部位可以是在躯体的任何区域。静脉畸形主要是静脉发育不良所导致的静脉血管结构异常。静脉畸形可在出生时即表现,呈终身渐进发展,无自愈性,局部呈侵袭性发展,严重者致畸、致残,影响凝血功能,甚至破裂大出血危及生命。静脉畸
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研究背景静脉畸形（Venous Malformations,VMs）,常被称为海绵状血管瘤,作为一种最常见、发病率最高的低流速脉管畸形,可单独发病或者合并其他脉管类畸形同时发病,其病变发生部位可以是在躯体的任何区域。静脉畸形主要是静脉发育不良所导致的静脉血管结构异常。静脉畸形可在出生时即表现,呈终身渐进发展,无自愈性,局部呈侵袭性发展,严重者致畸、致残,影响凝血功能,甚至破裂大出血危及生命。静脉畸形的临床表现根据其侵犯的程度和组织层次的不同如:皮肤、脂肪层、肌肉、正常血管和神经、骨质、肝脏及肺脏等脏器而表现出不同的症状和体征。而多层次多部位组织器官的受侵是造成重症静脉畸形并发凝血功能紊乱的根本原因。目前静脉畸形治疗手段包括有硬化治疗、手术治疗、靶向药物治疗、激光治疗等,但疗效差异较大且复发率较高。同时静脉畸形的发病机制尚不明确,有待进一步深入研究。本研究前期通过基因芯片技术在静脉畸形组织和正常静脉血管组织中分析差异表达基因,并对差异基因进行GO富集分析和KEGG通路富集分析,筛选出三叶因子3（trefoil factor 3,TFF3）来进一步研究。人TFF3被证实与大鼠TFF3具有高度同源性,既往发现在人小肠和结肠的杯状细胞中高度表达,可保护肠黏膜免受炎症等伤害,通过促进细胞粘膜修复、迁移、抑制细胞凋亡,可能与血管生成有关。既往较多研究发现TFF3在多种实体肿瘤中的m RNA和蛋白水平表达异常,TFF3被推测可能与促进肿瘤细胞的迁移、侵袭、增殖和血管生成有关。静脉畸形也具有局部侵袭性的生物学行为,静脉畸形的发展与局部病变畸形血管的大量生成有关,我们推测TFF3可能与静脉畸形的发展也有关。研究目的分析肢体静脉畸形病变的局部侵袭性发展与TFF3异常表达的可能相关性,进一步探讨TFF3在肢体静脉畸形局部侵袭发展中的可能生物学行为,为深入揭示静脉畸形局部侵袭发展机制和临床诊治探索提供新的思路。。研究方法回顾性选取郑州大学第三附属医院血管瘤外科2019年09月01日至2020年08月31日术中所取的26例肢体静脉畸形新鲜组织标本为实验组,26例距离病变切缘3cm外的肢体正常静脉新鲜组织标本为对照组,取部分组织用10%多聚甲醛固定后进行石蜡包埋备用,用于免疫组织化学（Immunohistochemistry,IHC）检测TFF3蛋白的阳性表达率;术中所取部分新鲜组织标本等分5份置于冻存管内,并逐一进行编号,即刻放入液氮中,后转移-80℃冰箱保存备用;从26例肢体静脉畸形标本中随机选取11例为实验组,其相应11例距病变切缘3cm外的肢体正常静脉血管组织为对照组,用于实时荧光定量聚合酶链反应技术（Quantitative real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,q RT-PCR）和蛋白质印迹试验（Western Blot）检测TFF3m RNA及蛋白的相对表达水平。结果1.免疫组织化学结果显示:26例肢体静脉血管畸形组织中TFF3蛋白的阳性表达率为80.77%（21/26）,26例肢体正常静脉血管组织中TFF3蛋白的阳性表达率11.54%（3/26）;两组通过卡方检验进行分析:χ~2=25.07,P＜0.001,差异有统计学意义。2.qRT-PCR结果显示:TFF3m RNA在11例肢体静脉畸形组织中的相对表达量为（7.436±6.612）,TFF3m RNA在11例肢体正常静脉血管组织中相对表达量为（1.494±2.572）,两组通过Student-t检验进行分析:t=2.778,P＜0.05,差异有统计学意义。3.Western Blot结果显示:TFF3蛋白在11例肢体静脉畸形组织的相对表达量为（0.425±0.481）,TFF3蛋白在11例肢体正常静脉血管组织中相对表达量为（0.089±0.051）,两组通过Student-t检验进行分析:t=2.304,P＜0.05,差异有统计学意义。结论TFF3mRNA和蛋白在肢体静脉畸形中过表达,且免疫组化结果显示病变越严重者差异性表达越显著,这提示TFF3可能与肢体静脉畸形的进展和局部侵袭性有关,同时本研究可为将来深入揭示静脉畸形局部侵袭发展机制提供前提基础,为临床诊治探索提供新的思路。
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