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目的:脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的肿瘤。因其向脑组织内呈浸润性生长,因此常规的手术加放疗、化疗效果差,且易于复发,病人的生存期不足一年,是目前神经外科学界正着力解决的难题。 方法:用立体定向仪将C6大鼠脑胶质瘤细胞株针刺接种于SD大鼠脑内,建立C6大鼠脑胶质瘤模型。选用SD大鼠共120只,分为伽玛刀治疗组和对照组,每组60只,接种后10-14天行MRI检查,确定成瘤并确认模型制作成功。给治疗组大鼠安装头颅固定仪及立体定向头架,用MRI扫描定位,并将数据传至计划系统,以胶质瘤中心作为靶点,肿瘤边缘剂量为35Gy,等剂量曲线为50%,进行伽玛刀治疗,在治疗后24h,48h,7D,14D,21D分别取材,每个时间点12只动物,取病理组织分别进行流式细胞学检测和免疫组化/HE染色。用免疫组化方法观察血管内皮生长因子(VEGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)表达变化,用流氏细胞仪检测细胞凋亡的情况。对照组确定成瘤后不做任何干预,与治疗组相同时间点取材.
结果:
1PCNA结果:典型的PCNA表达阳性细胞,均为细胞核着色,胞核呈黄色或棕黄色。对照组肿瘤细胞明显表达PCNA,表现为阳性细胞排列密集,胞核呈强阳性。治疗组大鼠于伽玛刀照射后48h即可见肿瘤内PCNA阳性细胞减少,胞核阳性强度减弱。随着时程推后,阳性细胞面密度(阳性细胞面密度=观察区内阳性细胞的总面积/观察区内所有细胞的总面积)呈下降趋势,在瘤周正常组织内可见到少量散在的PCNA阳性细胞。
2VEGF结果:VEGF染色定位于瘤细胞胞浆内,对照组呈强阳性(+++)表达,治疗组大鼠于伽玛刀照射后48h即可见肿瘤内VEGF阳性细胞减少,胞浆阳性强度减弱。阳性细胞面密度随时间延长呈下降趋势.
3细胞凋亡结果:伽玛刀治疗组肿瘤凋亡率明显高于对照组(P<0.05),于治疗后24h即可见肿瘤细胞凋亡率较对照组升高,照射后48h,细胞凋亡率达到最高峰,然后逐渐下降。
结论:
伽玛刀治疗后PCNA阳性表达细胞数与对照组相比表达减少,并随时间延长进一步减少,表明伽玛刀对肿瘤细胞增殖有抑制作用。治疗组大鼠VEGF表达较对照组减少,与PCNA变化呈正相关,表明伽玛刀治疗后肿瘤血管生长受到抑制。伽玛刀治疗组凋亡率较对照组明显升高,并于48h达到峰值,以后逐渐下降。说明伽玛刀照射肿瘤组织可诱导其产生凋亡,抑制肿瘤生长。