【摘 要】
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金丝皇菊是一种集观赏价值和饮用营养价值为一体的重要植物花卉,但目前相关产品单一,主要作为观赏用新鲜花卉和干燥用冲泡饮品出售,附加值低,且因外形不完美和干燥加工等过程易产生大量剩余废料,造成资源浪费。而金丝皇菊蛋白含量高,氨基酸组成丰富,是一种优良的蛋白多肽来源,但直接食用或热水冲泡均很难充分发挥其营养和保健功效。本论文目标即通过酶解金丝皇菊蛋白获得金丝皇菊多肽,研究开发其功能和潜在用途,进一步提高
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金丝皇菊是一种集观赏价值和饮用营养价值为一体的重要植物花卉,但目前相关产品单一,主要作为观赏用新鲜花卉和干燥用冲泡饮品出售,附加值低,且因外形不完美和干燥加工等过程易产生大量剩余废料,造成资源浪费。而金丝皇菊蛋白含量高,氨基酸组成丰富,是一种优良的蛋白多肽来源,但直接食用或热水冲泡均很难充分发挥其营养和保健功效。本论文目标即通过酶解金丝皇菊蛋白获得金丝皇菊多肽,研究开发其功能和潜在用途,进一步提高金丝皇菊附加值。本研究以金丝皇菊干燥残花（Imperial Chrysanthemun）为原料,通过研磨,碱溶酸沉的方法提取得到金丝皇菊蛋白。再选用三种不同酶解方式对上述蛋白进行酶解:使用风味蛋白酶和木瓜蛋白酶两种蛋白酶协同酶解、先使用风味蛋白酶后使用木瓜蛋白酶分步酶解、先使用木瓜蛋白酶后使用风味蛋白酶分步酶解,分别得到三种酶解多肽样品,依次为协同酶解产物（XTPH）、先使用风味蛋白酶后使用木瓜蛋白酶分步酶解产物（FMPH）、先使用木瓜蛋白酶后使用风味蛋白酶分步酶解产物（MFPH）。经活性筛选发现上述三种酶解多肽均具有一定程度的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其中FMPH的α-葡萄糖苷酶抑制活性更优。为了进一步寻找和确认上述多肽产物中具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的组分,利用超滤离心对三种不同酶解产物进行分离,经初步筛选后将研究焦点集中于分子量小于3000的组分,分别获得三个样品:FMPH-1、MFPH-1、XTPH-1,并经傅里叶红外光谱仪、荧光分光光度计等对结构变化进行了表征。同时活性测试结果表明:从FMPH中分离出的FMPH-1具有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,经LC-MS测定该多肽样品的主要成分为4-5个氨基酸组成的多肽。此外,选取菊花蛋白和FMPH-1两种样品在体外进行胃肠消化模拟,实验结果表明FMPH-1经消化模拟后的样品（FMY-1）,其α-葡萄糖苷酶抑制活性进一步提高,提示经酶解后的金丝皇菊多肽比金丝皇菊蛋白具有更好的体内功能特性。接下来对FMPH的酶解制备过程进行了优化,在单因素及正交实验的基础上,通过响应面实验优化得出最佳工艺条件:酶用量11800 U/g,风味酶与木瓜酶酶活添加比例为1:1,底物浓度为1.50%,在此条件下水解度达到22.57%。综上,本研究提取了金丝皇菊蛋白并利用不同酶解方式制备金丝皇菊酶解多肽,对多肽的性能及α-葡萄糖苷酶抑制活性进行了研究,得到了具有较好α-葡萄糖苷酶抑制活性的FMPH-1组分并对其进行了初步的结构研究,体外胃肠消化模拟实验显示:与未经酶解的金丝皇菊蛋白相比,酶解多肽具有更好的体内活性。最终通过工艺优化获得了FMPH最佳酶解条件,为金丝皇菊多肽进一步的研究与开发奠定了基础。
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