EB病毒(Epstein—Barr virus，EBV)为自然界广泛存在的疱疹病毒科DNA致瘤病毒，人群感染率高达90％以上。EBV除与人类多种淋巴系统肿瘤如伯基特淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤等的发生密切相关，还与鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma NPC)、部分胃癌等上皮性肿瘤的发生密切相关。近三十年来研究表明，世界范围内约10％的胃癌与EBV感染密切相关，这部分胃癌称为EB病毒相关胃癌(Epstein—Barr virus associated gastric carcinoma，EBVaGC)。 广州地区是与EBV感染密切相关的鼻咽癌的高发区，且该地区鼻咽癌组织中的EBV存在特殊的“f”型变异，研究发现该变异与鼻咽癌的发生发展密切相关。此外，V—val型EBNA1变异也常见于广州地区鼻咽癌组织中。那么，同是EBV相关上皮性肿瘤，在鼻咽癌高发区广州地区的EBVaGC中的EBV变异情况怎样？与该地区鼻咽癌中的EBV变异是否相同？与世界其他地区EBVaGC中的EBV变异是否相同？目前未见文献报道。 我们课题组前期对广州地区EBVaGC的临床病理特征和潜伏类型进行研究，共收集了676例普通胃癌和33例残胃癌手术切除标本，用EBER原位杂交方法分别筛选出45例(6.7％)和9例(27.3％) EBVaGC；发现EBVaGC中EBV的潜伏类型为Ⅰ型，与鼻咽癌中的潜伏类型(Ⅱ型)不同。提示EBV在致胃癌和鼻咽癌机制上可能有所不同。本课题拟在此基础上，进一步用PCR—RFLP和DNA测序相结合的方法，研究广州地区EBVaGC的病毒基因组多态性，并与广州地区鼻咽癌和世界其他地区EBVaGC中的情况相比较，为进一步阐明EBV致上皮癌变的机制打下基础。 本课题分为以下三部分： 第一部分普通胃癌中EBVaGC病毒分型和变异 [目的] 研究广州地区普通胃癌中EBVaGC的病毒分型和变异，并与该地区鼻咽癌和世界其他地区EBVaGC中的情况相比较，帮助阐明EBV致上皮癌变的机制。 [材料和方法] 采用PCR—RFLP和DNA测序相结合的方法，扩增五个不同的EBV基因片段，研究课题组已收集的45例广州地区普通胃癌EBVaGC中的EBV分型和变异，统计分析不同EBV亚型或变异型所占的比例。 [结果] 五个EBV基因片段在45例普通胃癌EBVaGC标本中均扩增成功；EBV分型以A型病毒株为主(44/45，97.8％)；变异型以“F”型、“I”型、“XhoI—”型、“del—LMP1”型为主，分别占82.2％(37/45)、100％(45/45)、75.6％(34/45)和93.3％(42/45)。 [结论] 广州地区EBVaGC中EBV以“F”型变异为主，与该地区鼻咽癌中EBV以“f”型变异为主明显不同；在EBV BamHI W1/I1交界区存在一个热点突变(149，972 T→C)，该突变在鼻咽癌中不存在；提示EBV在EBVaGC和鼻咽癌中的致病机制可能是不同的。 第二部分残胃癌中的EBVaGCU病毒分型和变异 [目的] 研究广州地区残胃癌中EBVaGC的病毒分型和变异，并与普通胃癌中的情况相比较，帮助阐明EBV致上皮癌变的机制。 [材料和方法] 采用PCR—RFLP和DNA测序相结合的方法，扩增五个不同的EBV基因片段，研究课题组已收集的9例广州地区残胃癌EBVaGC中的EBV分型和变异，统计分析不同EBV亚型或变异型所占的比例，并与普通胃癌EBVaGC中的情况相比较。 [结果] 五个EBV基因片段在9例残胃癌EBVaGC标本中均扩增成功；EBV分型以A型病毒株为主(8/9，88.9％)；变异型以“F”型、“I”型、“XhoI—”型、“del—LMP1”型为主，分别占88.9％(8/9)、100％(9/9)、55.6％(5/9)和88.9％(8/9)。 [结论] 残胃癌中EBVaGC的EBV分型和变异与普通胃癌中EBVaGC的EBV分型和变异相似，而残胃癌中EBVaGC的比例明显高于普通胃癌，提示胃粘膜上皮的损伤和/或胃粘膜微环境的改变有利于EBVaGC的发生。 第三部分普通胃癌中EBVAGC EBNA1基因变异 [目的] 研究广州地区EBVaGC中EBNA1基因变异情况，并与该地区鼻咽癌和世界其他地区EBVaGC中的情况相比较，探讨EBNA1基因变异的意义，帮助阐明EBV致上皮癌变的机制。 [材料和方法] 采用PCR和DNA测序相结合的方法，扩增EBNA1基因片段并进行序列分析，研究课题组已收集的45例EBVaGC中的EBNA1基因变异情况，统计分析不同EBNA1变异型所占的比例。 [结果] 45例EBVaGC标本成功扩增21例，占46.7％。在EBVaGC组织中可以检测到V—val，V—leu，P—ala和V—thr四种亚型，其中V—val亚型是最常见的亚型，占71.4％(15/21)，其次是V—leu亚型，占57.1％(12/21)；单一 EBNA1亚型感染占61.9％(13/21)。 [结论] 广州地区EBVaGC中V—val EBNA1变异型最常见，V—leu EBNA1变异型也比较常见，而在该地区鼻咽癌中，V—val变异型也最常见，但未见V—leu变异型，提示EBNA1在EBVaGC和鼻咽癌中的作用机制可能是不同的。