【摘 要】
：
线虫是最富有成果的促进发育和神经系统的分子机制进步的模式生物,它已经成为科学家眼中的明星生物. 线虫全体透明简单,已经成为生物学研究中的无价的工具,主要在特异性靶标的功能特性的研究方面,这个已经用基因组学的方法确定.秀丽隐杆线虫和高等生物,线虫和高级的生物体,以及简单和农业的成本效益,使为一种有效的活体模型,它适合于全生物体高生产率化合物筛选和广泛目标验证.线虫神经系统是非常简单的,雌雄同体
论文部分内容阅读
线虫是最富有成果的促进发育和神经系统的分子机制进步的模式生物,它已经成为科学家眼中的明星生物. 线虫全体透明简单,已经成为生物学研究中的无价的工具,主要在特异性靶标的功能特性的研究方面,这个已经用基因组学的方法确定.秀丽隐杆线虫和高等生物,线虫和高级的生物体,以及简单和农业的成本效益,使为一种有效的活体模型,它适合于全生物体高生产率化合物筛选和广泛目标验证.线虫神经系统是非常简单的,雌雄同体成虫仅302个神经元,其可分为运动神经元,感觉神经元和中间神经元.因此我们选择秀丽隐杆线虫作为我们工作的研究目标.在这里我们结合gateway技术以及位点特异性重组系统（Cre/loxP, FLP/FRT）,荧光共聚焦显微镜来标记秀丽隐杆线虫的神经元。我们选择启动子的重叠区,从而能够通过不同的荧光蛋白来标记出神经元。此外我们运用了重组系统,能够运用两个启动子的重叠区和位点特异性重组酶系统（FLP/FRT, Cre/LoxP）标记单个神经元.我们已经构建质粒中包含FLP/FRT或者Cre/loxP特异的重组系统来研究两种启动子驱动的神经元的表达系统.我们也构建了质粒中含有（FLP/FRT和Cre/loxP）位点特异性重组系统来研究三个特异性启动子驱动的神经元的表达.此外,我们运用启动子库结合gateway的方法促进线虫神经元的研究.在这个模型中,我们不仅可以标记神经元而且可以建立一个线虫的神经元的三维重构图谱. 另一方面,被发现一些精彩的工具和技能为通过标志着该特定神经元构建质粒已经发现出来,尤其是该酶切法该组合和多站点重组技术,不仅显示该高效和在酶切无缝连接反应,但也需要多站点重组反应重复使用.与此同时,通过应用这种方法找到基因“的条件表达谱,进一步研究线虫神经元和基因的功能 在此方面,我们可以标记感觉神经元ASH和ASI,由启动子sra-6P和gpa-HP, rab-3P和gpa-4P的交叉点.我们可以标记的神经元ASH,由三个启动子的rab-3p交集,我们已经使用了第二个启动子和第三都是相同的（gba-4P）可以在单个神经元表达ASI,这样在神经元功能的进一步研究做铺垫.
其他文献
DNA复制是细胞周期中的一项重要事件,而其中复制起始蛋白DnaA和复制起点oriC是参与DNA复制起始的主要组分。有关大肠杆菌的DNA复制起始研究已经非常深入,但对于蓝细菌中DNA复制起始的相关研究目前开展得并不多。本论文用生物信息学方法预测出丝状鱼腥蓝细菌PCC 7120的复制起点oriC,这段区域是位于染色体上的dnaA基因和dnaN基因之间、含有6个DnaA box并且富含AT的415bp的
变铅青链霉菌的DNA异常修饰系统是一种不同于甲基化修饰的新型修饰系统，它可使变铅青链霉菌DNA在电泳时易遭到氧化双链切割（Dnd表型，DNA degradation）（Zhou et al.,1988）。现已初步揭示这是一种硫元素的修饰（Zhou et al.,1999）。本研究从分子水平上对这种异常修饰进行了研究，缩小定位了异常修饰基因簇，并进行了核苷酸序列测定和分析，同时通过基因置换等技术对异
线虫由于具有神经系统简单,遗传操作方便及身体透明等优点而成为神经回路及脂肪代谢研究的良好模型。本文包括两方面内容：一是进食调节的神经回路及神经信号检测方法的研究；二是关于短期饥饿调节脂肪代谢研究。 进食是生物体最重要的行为之一,生物体在环境中生存必须面对复杂的环境变化带来的一切刺激。这些刺激包括环境的物理条件和化学条件变化。这些环境条件变化是否影响动物进食现在还不是很清楚。 我们选
Somatostatin（SST） is a regulatory peptide with two bioactive forms viz.SST-14 and SST-28.It acts on a wide array of tissue targets to modulate neurotransmission, inhibition of hormones secretion and r
生物体的生命活动是在多方面因素的严格调控下进行的,囊泡的分泌过程在对生物体的调控作用中起着重要作用,是大多数宏观调控过程的分子基础。通过高分辨率电子显微镜观察发现,囊泡可以分为致密核心大囊泡（LDCVs）和突触小囊泡（SVs）两类。致密核心大囊泡中的内涵物主要是大分子蛋白质和神经肽类物质,突触小囊泡中的内涵物则主要是一些神经递质。而近年来随着电生理技术和细胞成像技术的迅猛发展,我们可以直接对活体细
IK1（inward rectifier potassium channel）是哺乳动物心脏中具有强大内向整流特性的钾通道。心肌细胞动作电位发生过程中,IK1在稳定静息膜电位和三期复极中起着非常重要的作用。IK1强度减少,可以延长心肌细胞动作电位时程,导致长QT综合征,即Anderson’s syndrome。IK1强度增加,可能导致动作电位时程、有效不应期和QT间期缩短,有效不应期缩短则容易发生
肉鸡胫骨软骨发育不良（Tibial dyschondroplasia,TD）是一种以生长板无血管化和无矿化为特征的重要家禽胫跗骨疾病。它主要引起软骨细胞的异常分化和家禽的跛行,从而降低动物的生长性能,对家禽业造成巨大的经济损失。1.HIF-1ɑ抑制剂在福美双诱导的TD上的作用本研究旨在评估缺氧诱导因子-1α（Hypoxia-Inducible Factor-1α,HIF-1ɑ）抑制剂FK228在福
目的探讨TGF-β1/p38MAPK信号传导通路在大鼠坐骨神经慢性卡压损伤致骨骼肌纤维化过程中的作用。 方法随机选取108只雄性SD大鼠,随机分成6组,每组18只。A组（假手术组）：仅显露坐骨神经,不做其他处理；B组（即单纯卡压组）：按照德国Mackinnon建立坐骨神经慢性卡压损伤模型的方法卡压坐骨神经,不做其他处理；C组（坐骨神经慢性卡压损伤+稀释液DMSO注射组）；D组（坐骨神经慢性卡
Synaptotagmin（Syt）是一个广泛存在于神经和内分泌细胞内的分泌囊泡上的蛋白质家族。作为钙离子依赖性神经递质和激素释放过程中的钙离子感受器, Synaptotagmin触发和调节囊泡与靶膜的融合过程,参与对神经递质和激素释放过程的严格调控,也可能参与对细胞的蛋白质与膜转运的调节。该家族在哺乳动物中有16种亚型。它们在细胞内有各自不同的定位,并发挥不同的调节功能。通过亚型间以及亚型和效应
许多细菌和大多数的古菌基因组均编码称作CRISPR-Cas（clustered regularly interspaced short palindromic repeat-CRISPR-associated）的获得性免疫系统来抵御病毒或质粒的侵害。CRISPR-Cas系统被分为3个主要类型,I型,II型和III型,又被进一步划分为11个亚型。Sulfolobus islandicus Rey15