B7-H3(又称CD276)是一类与PD-L1胞外结构域(又称B7-H1)序列相似的I型膜蛋白。该分子在适应性免疫及抗肿瘤免疫中存在相互矛盾的共刺激及共抑制的争议作用,同时该分子本身对肿瘤发生和发展的影响也存在疑问。B7-H3分子的表达较为明确,在包括乳腺癌在内的多种恶性肿瘤中均有明确的表达上调,因此我们猜想B7-H3作为肿瘤的免疫抑制分子,抑制了抗肿瘤免疫。同时该分子也能够影响肿瘤细胞的恶性生物学行为。方法:通过免疫荧光标记流式细胞术的方式检测乳腺癌细胞株MCF-7及肝癌细胞株HepG2上B7-H3分子的表达,并通过siRNA转染的方法沉默肿瘤细胞B7-H3分子。以CCK8增殖曲线实验,集落形成实验,划痕实验比较B7-H3基因沉默前后对肿瘤生物学行为的影响。将基因沉默前后的肿瘤细胞与来自健康捐献者的外周血PBMC与CD3+T细胞共培养,比较B7-H3对T细胞增殖能力及免疫相关炎性分子表达的影响,并提取RNA及蛋白,探究B7-H3影响淋巴细胞功能的机制。结果:成功使用流式细胞术鉴定了 MCF-7及HepG2上B7-H3分子的表达,约99.93%的 MCF-7 细胞表达 B7-H3,58.27%的 HepG2 表达 B7-H3,选用 MCF-7 作为研究细胞。使用siRNA沉默B7-H3后,MCF-7上B7-H3的表达率由99.93%下降至5.47%,经siRNA沉默B7-H3后的MCF-7细胞命名为MCF-7-B7H3-/-,对照组细胞命名为 MCF-7-Gapdh。沉默 B7-H3 后,MCF-7-B7H3-/-增殖及迁移能力较 MCF-7-Gapdh下降。将MCF-7-B7H3-/-与MCF-7-Gapdh与来自健康捐献者的外周血PBMC与CD3+T细胞共培养后,我们发现在肿瘤细胞与PBMC共培养体系中,若肿瘤细胞高表达B7-H3,则会抑制CD8+T细胞的活化增殖及其功能,而不会影响CD4+T细胞的增殖,当抑制B7-H3表达后,CD4+T细胞与CD8+T细胞的增殖能力均有明显提升。后续实验发现B7-H3分子提高了T细胞上CTLA-4的表达上调，开抑制了T细胞释放RFNγ。在抑制B7-H3表达后CTLA-4均下降,IFNγ释放增加,同时我们发现IFNγ释放的抑制作用是通过抑制T细胞mTOR磷酸化来完成的。在阻断mTOR信号通路后,B7-H3对IFNy分泌的抑制作用被阻断。结论:我们的研究结果提示B7-H3促进MCF-7的增殖及迁移并可抑制CD4+、CD8+T细胞增殖,诱导T细胞高表达CTLA-4,并通过抑制T细胞mTOR磷酸化抑制IFNy释放。