脂肪与肥胖相关蛋白(FTO)促进肝癌细胞增殖、迁移

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目的:通过检索生物信息学数据库,明确脂肪与肥胖相关蛋白(FTO)在肝癌中的差异表达及与肝癌生存预后的关系;进一步从细胞层面明确FTO是否促进肝癌细胞Hep G2的增殖、迁移,为FTO作为治疗肝癌的靶点提供理论及实验依据。方法:1.检索GEPIA数据库,分析FTO在肝癌组织中的相对表达水平。检索UALCAN数据库,分析FTO表达水平与肝癌临床病理特征的关系。检索Kaplan-Meier Plotter数据库,分析FTO与肝癌生存预后关系。2.体外培养人肝癌细胞系Hep G2,将小干扰RNA和过表达质粒进行细胞转染,通过q RT-PCR、Western-Blot分别检测FTO m RNA、蛋白表达水平,验证转染效率。成功构建低表达及过表达FTO的肝癌细胞后,进行CCK-8增殖、平板克隆形成实验,探讨FTO对肝癌细胞Hep G2增殖的影响;进行Transwell迁移实验,探讨FTO对肝癌细胞Hep G2迁移的影响。结果:1.GEPIA数据库显示:FTO在肝癌组织中相对高表达(P<0.05)。UALCAN数据库显示:不同分期、病理分级、有淋巴结转移的肝癌组织中FTO m RNA表达水平高于正常肝组织(P<0.05),且表达水平与性别、年龄、体重无明显相关性(P>0.05)。Kaplan-Meier Plotter数据库显示:高表达FTO与肝癌预后不良相关(P<0.05)。2.qRT-PCR和Western-Blot结果显示:小干扰RNA及过表达质粒转染效率高,在肝癌细胞Hep G2中成功构建低表达和过表达FTO(P<0.05)。CCK-8、平板克隆形成实验结果显示:FTO促进肝癌细胞Hep G2的增殖(P<0.05);Transwell迁移实验结果显示:FTO促进肝癌细胞Hep G2的迁移(P<0.05)。结论:1.检索UALCAN、GEPIA、Kaplan-Meier Plotter数据库,得出FTO在肝癌中高表达,且高表达FTO与肝癌预后不良相关。2.FTO能促进肝癌细胞Hep G2的增殖、迁移。
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