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乳酸菌胞外多糖(lactic acid bacteria exopolysaccharides, LAB EPS)不仅具有独特的理化性质,同时还有多种生物学活性。干酪乳杆菌(Lactobacillus casei,简称L. casei) EPS是乳酸菌EPS中研究比较多的一种,由于L. casei在酸奶、干酪等食品中广泛应用,使得其EPS能够更多地发挥生理活性,同时还有许多尚未清楚的问题,引起科学工作者的研究兴趣。树突状细胞(dendritic cells, DCs)是目前已知的最强有力的一种专职抗原提呈细胞,是机体免疫应答的主要启动者,在免疫应答的诱导中发挥着关键作用。本研究主要探讨干酪乳杆菌胞外多糖对小鼠小肠黏膜固有层树突状细胞和骨髓来源树突状细胞(bone marrow derived dendritic cell, BMDCs)表型及功能成熟的影响,阐明干酪乳杆菌胞外多糖的免疫调节机制。本研究主要包括以下几个方面：(1)从干酪乳杆菌的发酵液中提取EPS。(2)采用细胞因子诱导法诱导骨髓单核细胞转化为DCs。(3)倒置显微镜观察细胞形态;用流式细胞仪分析肠黏膜固有层DCs表面CDllc分子、I-A/I-E、共刺激因子CD80的表达以及血液中和肠黏膜固有层中DCs数量的变化。(4)探讨不同剂量EPS对DCs分泌趋化因子及其受体的影响。体内实验采用双抗体夹心ELISA检测小鼠血清中趋化因子FKN、MIP-3α和促炎症因子IL-12p70的浓度。体外实验采用双抗体夹心ELISA检测细胞培养上清液中趋化因子受体CX3CR1、CCR6和促炎症因子IL-12p70的浓度。(5)探讨EPS对DCs趋化因子mRNA及其受体mRNA和IL-12mRNA转录水平的影响。采用RT-PCR检测肠黏膜固有层DCs趋化因子mRNA的转录水平以及小鼠骨髓来源DCs趋化因子受体mRNA和IL-12mRNA的转录水平。(6)探讨EPS对肠黏膜固有层中DCs亚型的影响。用流式细胞仪分析肠黏膜固有层中CD103c+CD11b+DCs和CD103c-CD11b+DCs数量的变化。(7)探讨EPS对骨髓来源DCs IL-12基因启动子组蛋白H3乙酰化水平的影响。采用染色质免疫沉淀试剂盒检测DCs IL-12p35和IL-12p40基因启动子组蛋白H3乙酰化水平。本研究得到如下结果：(1)EPS能够增加小鼠血清中IL-12p70、FKN和MIP-3α的浓度,在EPS浓度为50mg/kg时这种作用达到最大。(2)EPS能够促进骨髓来源DCs分泌IL-12p70、CCR6和CX3CR1,并且这种作用与EPS的浓度呈剂量依赖性。(3)流式细胞仪检测结果显示,干酪乳杆菌胞外多糖能够上调肠黏膜固有层中DCs表面I-A/I-E和共刺激因子CD80的表达、能够促进血液中的DCs向肠道中迁移,同时能使肠黏膜固有层中CD103c+CDllb+DCs的比例增加。(4)EPS能够上调肠黏膜固有层细胞中FKN mRNA和MIP-3a mRNA的转录水平。(5)EPS能够提高骨髓来源DCs CCR6mRNA.CX3CR1mRNA. IL-12p35mRNA和IL-12p40mRNA的转录水平。(6)EPS能增加肠黏膜固有层中CD103+CDllb+DCs的比例,降低CD103-CD11b+DCs的比例。(7)EPS能够提高骨髓来源DCs IL-12p35和IL-12p40基因启动子组蛋白H3的乙酰化水平本研究得到以下结论：干酪乳杆菌EPS能促进血液中DCs向肠黏膜固有层中迁移,且这种作用受趋化因子所调控,同时干酪乳杆菌EPS能促进肠黏膜固有层中DCs的成熟及CD103c+CDllb+DCs比例的增加,另外干酪乳杆菌EPS能通过表观遗传学途径影响小鼠骨髓来源DCs IL-12的表达。