目的:本实验以microRNA调控的引种金银花质量变异机制为主体,从金银花的活性成分和microRNA调控两个方面进行研究讨论,以期为揭示microRNA调控金银花质量变异机制提供科学依据,为金银花优良种质选育及质量评价奠定基础。方法:(1)基于UPLC-MS/MS技术检测原产地与引种产地的亚特金银花中黄酮、绿原酸、环烯迷萜三大类16种主要活性成分的含量,并进行统计学分析;(2)采用高通量测序技术分别构建原产地与引种产地金银花的microRNA文库,利用生物信息学方法分析5个microRNA文库的相关信息并进行统计;(3)对5个microRNA文库中的差异miR6300及其靶基因进行生物信息学分析,采用5’RLM-RACE方法验证差异miR6300与其预测靶基因Unigene19822的切割位点,利用qRT-PCR检测miR6300及Unigene19822在不同花期金银花的表达量;(4)采用高通量测序技术分别构建新鲜和干燥金银花的水煎液microRNA文库,并与金银花花蕾microRNA文库进行比较分析,采用生物信息学方法对所筛选的microRNA进行人靶向基因分析。结果:(1)与原产地亚特金银花相比,引种后的亚特金银花中主要活性成分的含量显著降低,说明引种会对金银花的质量产生影响,从而导致其临床功效可能发生改变;(2)统计获得了引种产地与原产地之间的特有序列及共有序列,引种产地与原产地间存在的差异microRNA、可能的新microRNA,并对其进行靶基因的预测;(3)通过5’RLM-RACE验证发现miR6300的切割位点可能位于与靶基因结合位点的下游1bp处,qRT-PCR结果表明miR6300与靶基因Unigene19822在不同开花期中的表达呈显著负相关;(4)通过对金银花水煎液microRNA文库的分析,获得了不同产地金银花呈表达显著差异、且存在于水煎液中的miR162a-3p,采用生物信息学方法分析预测得到4条人靶向基因,其功能分别为核受体辅阻遏物(NcoR)、丛状蛋白-A3(PLXNA3)、轴丝动力蛋白重链(DNAH3)。其中,核受体辅阻遏物(NcoR)可能与金银花的降血糖、降血脂的临床功效有关。结论:microRNA可能参与调控引种金银花的质量变异,影响其体内活性成分的积累,这为揭示microRNA调控引种金银花质量变异机制提供科学依据,为金银花优良种质选育及质量评价奠定基础。