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目的研究ZNF772基因启动子区DNA甲基化的状态与其m RNA及蛋白在宫颈癌中的表达、作用和临床意义,并分析ZNF772启动子区DNA甲基化水平与其表达变化的相关性。方法选取2015年9月至2018年9月于我院妇科因宫颈癌及子宫良性疾病住院的女性患者共85例,临床病历完整,选择正常宫颈组织45例为对照组,术后病理报告为宫颈鳞状细胞癌(SCC)40例为SCC组,严格按照标本收集的纳入及排除标准,所有取材经我院病理科主任医师明确诊断。选取3例宫颈鳞癌组织和年龄相匹配的3例正常宫颈组织作对照(Control),采用全基因组重亚硫酸盐测序(WGBS)联合转录组测序(RNA-seq)技术筛选DNA高甲基化和低表达的转录子;采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和亚硫酸盐修饰后PCR(BSP)方法在40例SCC患者宫颈组织样本和45例正常宫颈组织检测ZNF772的m RNA的表达水平和DNA甲基化状态,免疫组织化学(SP)法检测其蛋白表达量;在不同病理类型宫颈组织中ZNF772基因DNA甲基化状态与m RNA的表达水平进行相关性分析;在SCC组中分析ZNF772启动子区DNA甲基化与宫颈癌临床病理参数的关系。结果1临床病历资料统计结果分析,各组病例的基本信息(年龄,初潮年龄,月经周期,怀孕次数,流产次数,吸烟,饮酒)间比较差异无统计学意义(P>0.05)。2 WGBS联合RNA-seq筛查发现,SCC组织中ZNF772启动子区DNA甲基化率升高且m RNA表达下调(P>0.05);3 RT-q PCR检测两组宫颈组织样本结果显示,与Control组比较,在SCC组中ZNF772 m RNA的表达水平下降,差异有统计学意义(1.35 vs.0.43,t=8.351,P=0.016);4 BSP结果同样证实,与Control组比较,在SCC组中ZNF772启动子(-420、-422位点)DNA甲基化率显著升高,差异有统计学意义(-420位点:χ2=8.566,P=0.038;-422位点:χ2=6.332,P=0.043);5通过在线软件JASPAR对ZNF772启动子序列和转录因子结合位点进行预测,结果发现:-420、-422位点与KLF5、KLF4顺式作用元件重合,推测该位点可能影响ZNF772的转录水平;6免疫组织化学分析进一步证实,ZNF772棕黄色颗粒主要定位于细胞核,与Control组相比,在SCC组织中ZNF772阳性细胞的百分比降低,差异有统计学意义(81.23%vs.10.18%,t=3.802,P=0.005);7Spearman相关性分析显示,在对照组中,ZNF772基因-420Cp G位点发生甲基化修饰和未甲基化的m RNA表达水平比较,差异无统计学意义(1.18 vs.0.92,t=0.328,-420P=0.375),ZNF772的m RNA表达与-420Cp G位点DNA甲基化率无相关性(r-420=-0.089,P-420=0.263);在SCC组中,ZNF772基因-420Cp G位点发生甲基化和未甲基化的m RNA表达水平比较,差异具有统计学意义(0.31 vs.1.38,t=7.516,-420P=0.024),ZNF772的m RNA表达与-420Cp G位点DNA甲基化修饰呈负相关性(r-420=-0.350,P-420=0.045);8 SCC临床病理参的关系证实:ZNF772基因DNA甲基化状态与肿瘤大小、WHO病理分级及FIGO临床分期相关(均P<0.05),与患者年龄无关(P>0.05)。结论1 ZNF772基因在人宫颈癌组织中DNA甲基化率升高,m RNA和蛋白表达均降低。2 ZNF772基因启动子区DNA甲基化水平升高,与其m RNA及蛋白的表达相关,参与宫颈癌的发生、发展。3结合临床统计资料发现在宫颈癌组织中,ZNF772基因启动子区DNA甲基化状态与肿瘤大小、病理分级及临床分期均相关。图5幅;表7个;参131篇。