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目的寻找适宜的神经移植物桥接受损神经干使其结构重建和功能恢复是神经科学领域内多年来的研究目标。随着组织工程学技术的发展,同种异体脱细胞神经移植物获得了很好的发展,它作为有生物活性的神经替代物,具有良好的仿生性和组织相容性,移植后为轴突再生提供适宜的微环境,能够有效促进神经再生。然而,在临床应用中,进行同种异体间神经移植使供体的来源受到很大限制,异种神经细胞外基质材料能否作为适宜的移植物就成为亟待解决的问题。本实验分析比较不同种属哺乳动物脱细胞神经细胞外基质材料(acellular extracellular matrix,AECM)的组分和免疫原性,为解决临床周围神经损伤修复神经移植物的来源问题提供实验依据。材料与方法1、实验动物Wistar大鼠30只,SD大鼠8只,体重为200～250g;杂种犬8只,体重约16kg,均由中国医科大学实验动物部提供。2、脱细胞神经移植物的制备采用优化的化学萃取脱细胞方法制备犬和大鼠AECM,另采用低渗-酶消化法制备大鼠AECM。3、观察指标及检测方法(1)光、电镜观察AECM的形态结构。(2)变色酸2R-亮绿染色观察AECM中残留的髓鞘碎片,半定量分析比较脱细胞神经移植物中髓鞘碎片含量。(3)免疫组织化学技术使AECM中保留的成分层粘连蛋白和残留的施万细胞标志物S-100蛋白显像,半定量分析比较脱细胞神经移植物中各成分含量。(4)SDS-PAGE对比观察AECM中P0、43kDa、65kDa等蛋白条带。(5)通过HE染色对比观察同种异体和异种AECM埋植于皮下的免疫排斥反应。实验结果1、采用优化的化学萃取脱细胞方法制备的犬、大鼠AECM和低渗-酶消化法制备的大鼠AECM均较好地保留了基底膜管结构完整性。2、髓鞘碎片染色强度在犬和大鼠AECM间无显著性差异;在两种脱细胞方法制备的大鼠AECM间无显著性差异。3、层粘连蛋白和S-100蛋白阳性物质的积分光密度值在犬和大鼠AECM间无显著性差异;在两种脱细胞方法制备的大鼠AECM间无显著性差异。4、采用优化的化学萃取脱细胞方法制备的犬、大鼠AECM和低渗-酶消化法制备的大鼠AECM均保留较明显的生长相关蛋白条带,髓鞘蛋白条带消失。5、同种异体和异种AECM埋植后仅引起较弱的免疫排斥反应。结论1、经脱细胞处理后,不同种属哺乳动物AECM均具有良好的仿生性和组织相容性。2、采用优化的化学萃取脱细胞方法和低渗-酶消化法制备的AECM均具有良好的仿生性,是修复周围神经缺损的适宜移植物。