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目前,我国的酒精工业,主要有化学合成和粮食酿造两种方法。由于化学合成的主要原料乙烯,来自于石油加工,因此,该方法受到石油资源和价格的重大影响。而粮食酿造法,即利用酵母菌对粮食中葡萄糖发酵制得,原料取材方便,属于再生资源,是目前我国酒精生产的主要方法。为了解决石家庄地区夏季天气炎热条件下,酒精发酵率下降,生产成本提高的难题,以酒精酵母FY-23(Saccharomy cesecrecisia FY-23)(来自华北制药华胜有限公司)为出发菌株,采用原生质体诱变技术,筛选耐高温菌株,获得了优良菌株FY-23-8#,主要完成的工作内容如下:完成对出发菌株FY-23各方面基础生理性能的测定,包括:菌体大小、增殖状态、生长曲线、致死温度、耐酒精度检测,测定结果表明FY-23是一株稳定性良好的生产菌株,只是耐高温性较低,一般超过36℃,生长和酒精发酵能力下降明显。采用原生质体紫外诱变技术,38℃条件下,TTC平板初步筛选、CO2产生及酒精发酵复筛的方法,以期获得耐高温突变株。实验表明,在pH 7.5,30℃,加入15 g/L蜗牛酶处理25 min的条件下,原生质体形成率达到95.5%,高渗再生率达到5.1%,紫外线作为诱变剂,处理15 s,原生质体死亡率达到80%,38℃条件下TTC平板上初步筛选,获得9株生长旺盛的初筛菌株,经多次复筛,确定8号菌株性能突出,命名为FY-23-8#。完成了FY-23-8#菌株与对照菌株FY-23酒精发酵的小试比较试验,38℃,同样条件下,FY-23-8#的酒精发酵转化率达到44.8%,与对照39.8%相比,提高率为12.6%,酒精产量达到12.5%(V/V),与对照的9.3%(V/V)相比,提高率为34.4%。将FY-23-8#菌株传代10次,CO2的产生量基本稳定,表明突变株可以稳定遗传,生理特征测试表明,最适生长温度范围在35℃38℃,生长曲线表明菌体14 h达到稳定期,耐受酒精能力略高于对照菌株,可以在20%的葡萄糖中生长良好,耐糖性符合生产要求。采用正交试验表明培养FY-23-8#菌株最佳工艺条件为:料水比1:3、DE值大于95%、还原糖浓度20%、pH 5.0、接种量10%、38℃条件下,发酵结束时酒精含量达到11.4%。50 L条件下的中试放大实验,结果显示,FY-23-8#菌株38℃发酵酒精产量与对照FY-23菌株32℃条件下的酒精产量相差不大,都超过11%(V/V)。总之,通过以上工作,获得的诱变菌株FY-23-8#菌株,能在38℃下良好生长和酒精发酵,耐高温性良好,其他性能稳定遗传,是一株在高温气候条件下很有生产潜力的菌株。