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脓毒血症可以由任何部位的感染引起,临床上常见于肺炎、腹膜、泌尿系统感染、脑膜炎、脓肿等。其病原微生物包括细菌、真菌、病毒及寄生虫,脓毒血症也常常发生在有严重疾病的患者中,如严重烧伤、外科手术后等患者。目前普遍认为脓毒血症是由于内毒素进入血液引发的一种全身炎症反应综合征。内毒素是革兰氏阴性菌细胞外壁的组成成分,污染的手术器械、冲洗系统、生物制品如疫苗、抗体等表达生产过程中,都会有大量的内毒素产生和残留,因此内毒素几乎无处不在。此外在脓毒血症治疗过程中抗生素的使用,会再一次带来大量内毒素释放加重病人的病情,因此对于内毒素的去除是非常重要的。现有去除内毒素的方法大多存在去除能力有限、非特异性强,过多的非特异性吸附使其无法用于生物制品和临床血液中内毒素的去除。因此,临床上急需一种对内毒素吸附能力较强并且血液相容性好的内毒素结合材料。而ε-聚赖氨酸是由白色链霉菌产生的,并且具有光谱的抗菌性并且已经被批准作为一种安全的食品防腐剂,从安全角度讲它也是对人体无毒无害的。此外ε-聚赖氨酸具有25-30个赖氨酸,其可以通过阳离子的静电作用和疏水作用,同时对内毒素具有较好的吸附性。本论文通过以琼脂糖凝胶4FF为载体,ε-聚赖氨酸(ε-PLL)为配基合成了内毒素吸附剂,通过对内毒素水溶液和血浆溶液吸附的动力学和热力学实验及对FITC-LPS的吸附,表明此吸附剂对内毒素有较好的吸附能力,此外还对此吸附剂进行优化,以达到对内毒素较好的特异性吸附和对血浆中其他成分的非特异性吸附。具体研究内容为:(1)琼脂糖-ε-聚赖氨酸吸附剂的合成:环氧活化琼脂糖凝胶的羟基,通过环氧基和ε-聚赖氨酸(ε-PLL)偶联,合成了琼脂糖-ε-聚赖氨酸吸附剂,然后通过EDC/NHS活化其羧基,偶联一些带疏水和氨基的化学物质,合成琼脂糖-ε-聚赖氨酸-R吸附剂,以期待达到对内毒素较好的吸附。对内毒素的吸附实验表明,琼脂糖-ε-聚赖氨酸的吸附效果优于其他吸附剂。(2)内毒素的检测方法建立:采用动态显色法(0.005-10 EU)测定内毒素含量,此方法优于此前的显色基质法(0.01-0.1,0.1-1 EU),并对不同种类的抗凝剂的血液进行回收率的实验,确定肝素钠抗凝的血液满足药典对于内毒素检测回收率的要求,后续实验血浆均采用肝素钠抗凝。(3)通过环氧活化琼脂糖,偶联多粘菌素B(PMB)合成了琼脂糖-多粘菌素B(PMB)内毒素吸附剂,控制氨基密度大致相同,通过对低浓度内毒素血浆溶液的吸附得出琼脂糖-ε-聚赖氨酸对内毒素的吸附优于琼脂糖-多粘菌素B(PMB)。(4)对上述琼脂糖-ε-聚赖氨酸进行优化,分别优化环氧基密度、氨基密度,对内毒素水溶液和血浆溶液吸附的动力学和热力学实验及对FITC-LPS的吸附实验,验证此吸附剂对内毒素有较好的吸附能力,在内毒素血浆浓度为10 EU/mL(1 ng/mL)时,此吸附剂对其吸附率为90%,吸附容量为46.53 EU/mL。(5)此吸附剂的溶血率为3.75%<5%,满足药典规定。此外不同氨基密度的吸附剂吸附前后血浆总蛋白和白蛋白相对变化率都在10%以下,即血浆蛋白能够有90%以上的回收率,且对内毒素的吸附效果较好,结果均在临床允许范围内,说明此吸附剂血液相容性较好,其具有潜在的临床应用前景。