猪传染性胸膜肺炎(procine contagious pleuropneumoniae,PCP)是由猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的一种急性呼吸道传染病,给我国养猪业造成了巨大的经济损失。Apx毒素(Actinobacillus pleuropneumoniae RTX Toxin)是由APP产生的溶血外毒素,它既是APP重要的毒力因子,也是APP重要的保护性抗原。本研究通过对四种Apx毒素的结构基因进行生物信息学分析,根据其功能位点对Apx-N端、Apx-C端、Apx-NC(N端+C端)及Apx-FL进行了基因克隆,共构建了13个重组质粒(ApxIV毒素只构建了ApxIV-N端),并成功表达出12个重组蛋白,且均为包涵体。将重组蛋白与铝胶佐剂混合配制成基因工程亚单位疫苗免疫小鼠,分别以1型和15型APP对免疫小鼠进行保护实验,结果表明:ApxI-C和ApxIII-C蛋白对1型和15型APP均有较好的保护效果,其中ApxI-C的保护率分别为83.3%和66.7%,ApxIII-C的保护率均为66.7%;ApxI-NC、ApxI-FL、ApxII-N蛋白仅对1型APP有保护效果,保护率分别为100%、83.3%、33.3%;毒素ApxII、ApxIII、ApxIV类重组蛋白仅对15型APP有保护效果(ApxII-N除外),其中ApxII-NC、ApxII-FL、ApxIII-NC、ApxIII-FL的保护率均为83.3%,ApxIV-N保护率为66.7%,ApxIII-N保护率为50%。本次研究表明:(1)Apx毒素是APP的重要保护性抗原之一;(2)ApxI-C和ApxIII-C对1型和15型APP均具有较好的保护效果,可能是APP潜在的交叉保护性抗原,可进行进一步的开发和探索。