金丝桃素是一种天然存在生物活性物质,因其广泛的药理作用而备受关注,在预防和治疗癌症方面具有广阔的应用前景。目前,金丝桃素的主要来源是从贯叶连翘中提取。金丝桃素在生物体内含量低,贯叶连翘中的含量也不足0.3%,高纯度的金丝桃素制备成本高、保存和使用条件苛刻,导致金丝桃素原料药的工业化生产和药物研究受阻。目前,国内外对金丝桃素的提取检测方法、药理和临床进行了大量的研究,也报道了很多有效的检测方法。本研究在建立了金丝桃素高效液相色谱检测方法的基础上,进一步进行了方法学验证,在金丝桃素HPLC检测方法进行了条件筛选后,得到了完整的检测方法,根据药典的和质量管理的相关规定进行方法学验证,验证项目包括系统适应性、专属性、检测限、定量限、线性与范围、精密度（重复性）、准确度、溶液稳定性和方法耐用性。验证结果显示当前检测方法的金丝桃素检测限和定量限分别为5.2和10.4 mg/L,并且在10.4～124.8 mg/L范围之间线性关系良好（R~2=0.99927）,其他的验证项目结果也证明当前检测方法的可行性和适应性,为原料药金丝桃素的新药申报提供可靠资料。金丝桃素的对度光、热和氧都不稳定。选取金丝桃素提取和使用过程中的稳定性影响因素,进行超声、温度、微波、溶剂体系、中长期保存和降解实验。120 min内超声对金丝桃素稳定性几乎没有影响,可以作为加速金丝桃素溶解的可靠手段。金丝桃素对温度敏感,金丝桃素溶液最佳封存温度为-20℃,60℃以下可48 h内短期密封避光保存,60℃以上金丝桃素不稳定。在550 W功率的微波条件下金丝桃素最稳定的,可作为辅助提取手段。对于中长期稳定性,10天内高温、低温、强光条件的结果均表明金丝桃素溶液稳定性不佳。通过对以上因素的考察,获得了比较全面的稳定性影响因素评价结果,为金丝桃素的制备方法和后续制剂研究提供了参考。利用金丝桃素的光学性质初步研究了金丝桃素在含水条件下的聚合情况,金丝桃素的聚合程度和含水量的呈正相关,含水量越大,金丝桃素聚合产生的聚合物越多,聚合物产生的速度和在水环境中的停留时间长短几乎没有关系。然而,聚合物的大小和停留时间有比较大的联系,停留时间越长,聚合物固体颗粒越大,且固体颗粒可以通过0.2μm滤纸完全过滤,是分离聚合物的简单高效的方法。金丝桃素聚合物的研究为优化金丝桃素提取过程的条件,为下游产品的水溶性和稳定性研究提供重要参考。