【摘 要】
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本研究通过RT-PCR及western blotting等方法检测到在大鼠视网膜组织、高原鼠兔视网膜组织、人视网膜母细胞瘤细胞株SO-Rb50,70细胞、大鼠视网膜神经元中neuroglobin的表达。
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本研究通过RT-PCR及western blotting等方法检测到在大鼠视网膜组织、高原鼠兔视网膜组织、人视网膜母细胞瘤细胞株SO-Rb50,70细胞、大鼠视网膜神经元中neuroglobin的表达。通过建立沙鼠视网膜缺血缺氧损伤模型,检测到neuroglobin在视网膜组织中的表达量发生明显的变化。Neuroglobin mRNA的表达呈现时相性的变化:沙鼠视网膜缺血5-10min时表达达到高峰,发挥明显上调作用。在酵母双杂交筛出Na+,K+-ATPaseβ2亚基是与neuroglobin发生相互作用的蛋白质的前期工作基础上,本实验获得了GST-Na+,K+-ATPaseβ2亚基-CT的原核表达产物。通过免疫家兔,成功得到Na+,K+-ATPaseβ2亚基的多克隆抗体,并予以充分鉴定。检测到在上述视网膜组织及相关细胞中也同样存在Na+,K+-ATPaseβ2亚基的表达。进而,通过免疫共沉淀实验进一步检测到二者生理状态下是以复合体的形式存在,从而充分证明了二者在视网膜中相互作用的可靠性。为明确neuroglobin保护视网膜耐受缺氧损伤的分子机制奠定重要的基础。
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