心肌损伤免疫荧光检测方法及试剂卡

来源 :长春理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong458
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急性心肌梗死发病迅速,死亡率高并且发病前潜伏性强等特性,近些年来已经成为人类健康的最具有威胁的疾病之一。心肌肌钙蛋白I(cTnI)以及C反应蛋白(CRP)是心肌细胞发生损伤的重要系列标志物,对于急性心肌梗死的快速诊断有着极为重要的意义。本研究针对人体血液中的心肌肌钙蛋白I(cTnI)和C反应蛋白(CRP)分别建立了两种基于量子点荧光免疫分析方法,研制了2种定量检测试纸条。主要原理是将光致发光与免疫反应相结合,采用双抗体夹心法,将一种单克隆抗体与量子点进行偶联作成荧光标记物,而将另一种对抗原不同作用靶点的单克隆抗体包被到硝酸纤维素膜上,两者与样本中的抗原形成“三明治”免疫复合物,标记的量子点在紫外光激发下发出红光,通过检测产生的光子的相对发光单位(RLU)从而定量检测人体血清中的心肌肌钙蛋白I和C反应蛋白含量。本文通过抗原抗体原料的筛选、量子点标记及表征、免疫层析试纸条的构建及优化、方法学评估等系列实验。结果显示cTnI试纸条线性范围0.01 ng/ml~0.5μg/ml,总精密度CV<5%;CRP试纸条线性范围0.1ng/m L~1μg/ml,总精密度CV<5%,临床样本测试结果显示与进口试剂具有良好的相关性,肌钙蛋白I和C反应蛋白试纸条的各项性能指标均已经达到同类进口试剂的水平。为AMI的快速诊断技术及试纸条产品开发提供实验基础。
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