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目的:探讨环孢霉素A预处理对HTK液冷灌注保存12小时供肝的可能保护作用及移植后对肝脏的影响,为实验及临床肝脏移植提供参考依据。 方法:选用雄性成年SD大鼠共130只,体重约210±20克,采用Kamada双袖套法并加以改进,建立冷保存时间12小时的SD大鼠原位肝移植模型,大鼠随机分为两组:A组即对照组,供肝获取后HTK液4℃保存12小时,行原位肝移植;B组即实验组,用含1μM的环孢霉素A预处理的HTK液4℃灌注保存12小时,行原位肝移植。各组大鼠肝脏保存期0h、3h、6h、12h分别留取灌洗液及移植后12h、24h、48h、72h、术后7天分别留取血清和肝脏组织标本,每一时相点取5-8只大鼠测定血清ALT、AST、LDH水平评估肝细胞的功能,测定肝组织线粒体功能指标RCR、P/O值及ATP含量评估线粒体功能,光镜及透射电镜观察组织结构改变,TUNEL法检测肝组织细胞调亡,免疫组化法检测Bcl-2的表达。计量资料均用均数加减标准差(X±标准差)表示,所有数据应用SPSS10.0统计软件处理,统计方法采用方差分析或t检验,P<0.05判定为差异具有显著性意义。 结果: ①两组不同时间段肝脏ALT、AST、LDH含量:B组供肝保存12小时的ALT、AST、LDH水平分别为65.57±7.89、34.71±6.26、473.85±285.66与A组供肝保存12小时的ALT、AST、LDH水平分别为94.86±27.19、58.29±22.27、681.38±160.32比较,差异具有显著性意义p<0.05。在保存期0h、3h、6h、两组3种指标均无显著意义p>0.05。B组在移植后12h血清中ALT、AST、LDH水平分别为788±94.43、568.2±55.62、916.6±53.26;24h血清中ALT、AST、LDH水平分别为498.8±77.83、259±71.16、687.8±43.52;48h血清中ALT、LDH水平分别为398.4±35.22、439.5±28.02;72h血清中ALT、LDH水平分别为268.2±50.97、316.2±97.52,与A组血清中同一时间段ALT、AST、