目的:5-氟尿嘧啶（5-Fu）是用于治疗结直肠癌（CRC）患者的一线药物。然而,5-Fu的化疗耐药是CRC有效治疗的主要障碍,尤其是微卫星稳定型（MSS）CRC。由于在MSS型CRC细胞株中5-Fu的敏感性与催产素受体（OXTR）的表达水平呈显著负相关,表明通过抑制MSS型CRC细胞中OXTR表达可能增强5-Fu的敏感性。因此,本文旨在研究5-Fu与OXTR拮抗剂阿托西班联合在MSS型CRC细胞中的协同抗肿瘤活性及其分子机制。方法:首先,我们在微卫星不稳定型（MSI）和MSS型CRC细胞中对5-Fu的敏感性与基因表达之间的相关性进行分析。然后,采用MTT法检测相关表达基因的抑制剂或激动剂的体外抗肿瘤活性,筛选出与5-Fu有协同作用的药物。用CompuSyn软件分析5-Fu与协同药物在MSI和MSS型CRC细胞中的协同效果。之后,采用实时荧光定量PCR（qPCR）方法进行基因筛选,筛选出与5-Fu协同作用相关的基因。再用MTT法分析协同作用相关基因对CRC细胞中5-Fu细胞毒性的影响。接下来,我们用qPCR及蛋白免疫印迹法（WB）对MSS型CRC细胞中协同药物逆转协同作用相关基因表达的分子机制进行探究。最后,将MSI型细胞（HCT-116）和MSS型细胞（SW480）分别注射到裸鼠皮下构建移植瘤模型,评估5-Fu与协同药物单独使用或联合使用的体内抗肿瘤作用。结果:我们发现MSS型CRC细胞中5-Fu的IC50值显著高于MSI型CRC细胞。体外活性试验结果显示,OXTR拮抗剂阿托西班与5-Fu具有很好的协同抗肿瘤效果。相较于5-Fu单独给药,5-Fu与40 μM阿托西班联合给予CRC细胞时,SW480细胞中5-Fu的IC50值从43.80 μM降低到0.54 μM,变化倍数为81.11倍;在SW620细胞中,5-Fu的IC50值从16.57 μM降低至0.49 μM,变化倍数为33.82倍;在HCT-8细胞中,5-Fu的IC50值从18.85 μM降至4.43 μM,变化倍数为4.26倍;在HCT-116细胞中,5-Fu的IC50值从8.50 μM降至2.13μM,变化倍数为3.99倍。CompuSyn软件分析结果表明,5-Fu与阿托西班仅在MSS型CRC细胞中存在协同作用,在MSI型CRC细胞中不存在协同作用。进一步研究发现,5-Fu可以诱导MSS型CRC细胞中GATA3基因表达上调,同时阿托西班可以逆转5-Fu诱导的GATA3;但在MSI型CRC细胞中,5-Fu不会诱导GATA3表达上调。基因功能研究发现,在SW480和SW620细胞中敲低GATA3可以显著增强细胞对5-Fu的敏感性,而过表达GATA3则显著减弱细胞对5-Fu的敏感性。但是,在HCT-116和HCT-8细胞中,敲低或过表达GATA3对5-Fu的细胞毒性的影响均不大。在SW480和SW620细胞中分别敲低或过表达OXTR可以显著下调或上调GATA3;然而,在HCT-116和HCT8细胞中,无论敲低还是过表达OXTR对GATA3的表达均无明显影响。最后,体内活性实验结果显示,5-Fu与阿托西班联用可以显著抑制MSS型SW480细胞裸鼠皮下移植瘤的生长;对MSI型HCT-116细胞移植瘤的抑制效果却很差。同时,我们发现,5-Fu显著上调了SW480细胞移植瘤和HCT-116细胞移植瘤中GATA3的表达;当5-Fu与阿托西班联用时,5-Fu上调的GATA3在SW480细胞移植瘤中被成功逆转,在HCT-116细胞移植瘤中却没有被逆转,这与体外实验结果一致。结论:MSS型CRC细胞和肿瘤通过上调GATA3表达来降低5-Fu的细胞毒性;而阿托西班可以逆转5-Fu诱导的GATA3表达,从而显著增强5-Fu在MSS型CRC细胞和肿瘤中的抗肿瘤作用。这为阿托西班和5-Fu的联合治疗MSS型CRC提供了一种新的治疗策略。